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实验三线粒体和液泡系的

超活染色与观察实验目的观察动、植物活细胞内线粒体、液泡的形态、数量和分布了解细胞和细胞器的超活染色技术。二实验原理STEP03STEP01STEP02活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒的一种染色方法。活体染色可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据染色剂性质和染色方法不同，分为体内活染和体外活染。活体染色之所以能固定、堆积在细胞内某些特殊的部分，主要是染料的“电化学”特性起重要作用。碱性燃料的胶粒表面带阳离子，酸性染料的胶粒表面带有阴离子，而被染的部分本身也是具有阴离子或阳离子，这样，他们彼此就发生了吸引作用。但不是任何染料都可以作为活体染色剂之用，应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，而且总要配成稀淡的溶液来使用。一般是以碱性染料最为适用，可能因为它具有溶解在类脂质的特性，易于被细胞吸收，JanusgreenB和中性红两种碱性染料是活体染色剂中最重要的染料，对于线粒体和液泡系的染色各有专一性。詹纳斯绿Ｂ可专一性地对对线粒体进行活染,这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态(即有色状态),呈蓝绿色。中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中的液泡系染成红色。三实验用品显微镜、恒温水浴锅、、剪刀、镊子、解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸．器材：01Ringer液、1/5000詹纳斯绿Ｂ、1/3000中性红．试剂：0201．材料：02人口腔上皮细胞03洋葱鳞茎内表皮细胞04小麦或黄豆幼根根尖四实验方法线粒体的超活染色与观察詹纳斯绿B能专一对线粒体进行超活染色，呈蓝绿色。1人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色观察

载玻片→37℃水浴锅的金属板→滴两滴詹纳斯绿B染液低倍镜→平展的口腔上皮细胞→高倍镜→颗粒或短棒状线粒体牙签→从口腔粘膜刮取上皮细胞→放入载玻片染液→染色10-15分钟→盖上盖玻片→观察3241洋葱鳞茎表皮细胞线粒体的吸去染液→加一滴Ringer液→盖上盖玻片→观察超活染色载玻片→滴一滴詹纳斯绿B染液→撕取一小片洋葱鳞茎内表皮→染色10-15分钟STEP01STEP02液泡系的超活染色与观察中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中的液泡系染成红色。