微生物的生长与代谢.pptVIP

最常见的鉴别性培养基是伊红美蓝乳糖培养基，即EMB培养基。它在饮用水、牛奶的大肠菌群数等细菌学检查和大肠杆菌的遗传学研究工作中有着重要的用途。用于鉴别不同类型微生物的培养基，在培养基中加入某种特殊化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种微生物与其他微生物区分开来。1培养基组分满足微生物的需要（目的明确）3物理化学条件适宜（条件适宜）2营养物的浓度与比例应恰当（营养协调）4根据培养目的选择原料及其来源（经济节约）二、培养基的配制原则培养基组分满足微生物的需要01即根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。不同营养类型的微生物，其对营养物的需求差异很大。如自养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物质组成。异养做生物的培养基至少需要含有一种有机物质，但有机物的种类需适应所培养菌的特点。02按微生物的主要类群来说，它们所需要的培养基成分也不同：1细菌：牛肉膏蛋白胨培养基2放线菌：高氏一号培养基3真菌：查氏合成培养基4酵母菌：麦芽汁5当对试验菌营养需求特点不清楚的时候，可以采用‘生长谱’法进行测定。6氮源中所含的氮原子的mol数碳源中的碳原子的mol数C/N比值=碳氮比（C/N）直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累，故常作为考察培养基组成时的一个重要指标。浓度过小——不能满足微生物生长的需要。浓度过高——微生物的生长起抑制作用，营养物的浓度与比例应恰当C/N＝4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；C/N＝3/1时，菌体生长受抑制，而谷氨酸大量增加。01应注意各营养物质之间的浓度比；培养基中各营养物质之间的浓度比直接影响微生物的生长与繁殖和（或）代谢产物的形成与积累，尤其是碳氮比（C／N）的影响更为明显。02例：在谷氨酸生产中还应注意：速效性氮（或碳）源与迟效性氮（或碳）源的比例；各种金属离子间的比例（影响营养物质的渗透和其他代谢活动）。培养基中各种元素的比例需要平衡。pH:各类微生物的最适生长pH值各不相同：1细菌：7.0~8.0 放线菌：7.5~8.52酵母菌：3.8~6.0 霉菌：4.0~5.83在微生物的生长和代谢过程中，由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累，培养基的初始pH值会发生改变。4物理化学条件适宜为了维持培养基pH值的相对恒定，通常采用下列两种方式：1内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。2外源调节：按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液。3磷酸缓冲液：pH值从6.0~7.6之间K2HPO4+HClKH2PO4+KClKH2PO4+KOHK2HPO4+H2O加入CaCO3： CO32–HCO3–H2CO3CO2+H2O+H+–H–+H+–H–培养基中所含氨基酸、肽、蛋白质等物质也可起到缓冲作用。渗透压和aw渗透压 等渗溶液 适宜微生物生长高渗溶液 细胞发生质壁分离低渗溶液 细胞吸水膨胀，直至破裂01020304各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求：培养基是多氧化还原偶的复杂电化学系统，测出的Eh值仅代表其综合结果。好氧微生物：+0.3~+0.4V,(在0.1V以上的环境中均能生长)；厌氧微生物：只能在+0.1V以下生长；兼性厌氧微生物：+0.1V以上呼吸、+0.1V以下发酵对微生物影响最大的是：分子氧和分子氢的浓度05培养基中常用的还原剂：巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。氧化还原电势根据培养基的应用目的选择原料及其来源该培养基的应用目的，即：是培养菌体还是积累代谢产物？是实验室种子培养还是大规模发酵？代谢产物是初级代谢产物还是次级代谢产物？用于培养菌体种子的培养基营养应丰富，氮源含量宜高（碳氮比低）；01用于大量生产代谢产物的培养基其氮源一般应比种子培养基稍低，（但若发酵产物是含氮化合物时，有时还应提高培养基的氮源含量）；若代谢产物是次级代谢产物时要考虑是否加入特殊元素或特定的代谢产物；02当所设计的是大规模发酵用的培养基时，应重视培养基中各成份的来源和价格，应选择来源广泛、价格低廉的原料，提倡以粗代精，以废代好。03生态模拟：调查所培养菌的生