《动物细胞细胞工程》课件.pptVIP

**********************动物细胞工程动物细胞工程是一个多学科交叉的前沿领域,涉及生物学、材料科学、工程学等多个学科。它主要研究如何利用动物细胞进行各种功能性产品的制造和生产。课程导引课程概述本课程将全面介绍动物细胞工程的基本原理和实践操作,涵盖细胞培养、细胞分离纯化、基因转染等重要技术。学习目标掌握动物细胞培养的基本方法,了解细胞工程在药物研发、疫苗生产等领域的重要应用。课程结构课程包括理论教学、实验操作演示和实践训练等,帮助学生全面掌握动物细胞工程的相关知识和技能。细胞工程概述细胞工程是一门综合性学科,涉及细胞生物学、遗传学、分子生物学等多个领域。它旨在利用细胞的生长、分裂、分化等特性,开发出具有特殊功能的细胞系,并将其应用于医学、生物技术、制药等领域。细胞工程的核心技术包括细胞培养、基因操作、细胞分离纯化等,可用于生产疫苗、单克隆抗体、基因治疗药物等。细胞培养基及培养条件培养基组成细胞培养基含有各种必需的营养物质,如氨基酸、维生素、糖和无机盐,能为细胞提供生长所需的营养。培养环境培养细胞需要在温度、pH值、氧浓度等严格受控的理想环境下进行,确保细胞健康生长。无菌操作细胞培养全过程必须在无菌操作条件下进行,以防止细菌或病毒污染,保证细胞安全培养。细胞株的获得与应用1细胞株的建立从原代细胞分离得到细胞株需要选择适当的分离方法和培养条件,并对细胞进行无限增殖的诱导,以获得稳定的细胞系。2细胞株的鉴定对获得的细胞株进行生物学特性、遗传特性和表型分析,确保细胞株的纯度和稳定性。3细胞株的应用细胞株广泛应用于生物医药研究、疫苗生产、细胞治疗等领域,发挥着重要作用。动物细胞培养基本操作技巧1无菌操作严格遵守无菌规程,防止细胞受到污染2细胞计数准确计算细胞密度,确保最佳培养条件3传代操作及时传代以维持细胞良好生长状态4保存冻存建立细胞银行以备长期保存利用动物细胞培养是一项复杂的技术,需要遵循严格的无菌操作程序。我们必须准确计算细胞密度,定期传代以保持细胞生长活力。同时建立细胞库,通过冻存保存细胞以备长期使用。掌握这些基本技巧是开展动物细胞工程研究的关键。悬浮培养及其应用灵活性高悬浮培养可实现细胞的自由悬浮生长,无需附着基质,操作更加便利。大规模扩增采用生物反应器进行悬浮培养,可以实现细胞大规模、高密度的扩增。用于疫苗生产悬浮培养的细胞系可用于生产病毒疫苗,是一种高效的疫苗生产技术。用于蛋白质表达悬浮培养的细胞可用于高效表达各种重组蛋白,是蛋白质工程的重要技术。黏附培养及其应用1独特的细胞特性某些动物细胞具有黏附生长特性,需要依附于基质表面才能生长和繁衍。2适用于不同目的黏附培养可用于生产单克隆抗体、疫苗等生物制品,也可用于细胞毒性测试等。3特殊培养基要求黏附培养需要特殊的培养基和培养容器,以确保细胞可以稳定生长并保持功能。4高分辨度分析通过黏附培养,可以更清晰地观察和分析单个细胞的形态及行为特征。细胞分离与纯化1分散化使细胞从组织中分离开2密度梯度离心按密度分层分离细胞3免疫亲和层析利用细胞表面标志物分离纯化4微流控器件利用微流控技术精准分离细胞细胞分离与纯化是细胞工程领域的关键技术,通过物理、化学和生物学方法从复杂的细胞混合物中获得特定性质的细胞群。这些技术为后续细胞培养、分析和应用奠定了基础。细胞融合及杂交瘤细胞细胞融合通过物理或化学方法将不同类型的细胞融合在一起,形成新的杂交细胞。杂交瘤细胞融合抗体分泌细胞与肿瘤细胞,获得可永续分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。单克隆抗体杂交瘤细胞可大规模生产特异性单克隆抗体,应用于诊断、治疗等领域。细胞株的无菌培养洁净环境在无菌操作台进行细胞培养,确保工作环境洁净,避免细菌或真菌污染。无菌操作使用无菌移液管和移液器进行细胞培养和传代,严格遵守无菌操作规程。无菌培养基使用灭菌过的培养基和试剂,确保细胞获得无菌环境生长发育。抗生素使用必要时可添加适量抗生素,进一步预防细菌污染。但要注意抗生素可能对细胞产生毒性影响。有限培养寿命与无限培养寿命细胞培养有两种类型:有限培养寿命细胞和无限培养寿命细胞。有限培养寿命细胞经过有限次数的分裂后会进入衰老期并最终死亡,而无限培养寿命细胞可以持续分裂而不会衰老。这种差异是由于细胞染色体末端的端粒长度变化所致。理解细胞培养寿命的差异对于制定合理的培养策略和细胞应用具有重要意义。细胞的冷冻保存与复苏冷冻配制使用含有甘油或二甲基亚砜等保护剂的培养基冷冻细胞,降低冰晶对细胞的损伤。控制冷冻速度合理控制细胞悬液的冷冻速