微生物代谢控制发酵第五章.pptVIP

第二节柠檬酸发酵机制与代谢调控柠檬酸??citricacid??取代羧酸——羟基酸——醇酸乳酸苹果酸酒石酸柠檬酸（枸椽酸）???-羟基丙酸2-羟基丙酸321羟基丁二酸2,3-二羟基丁二酸2-羟基-1,2,3-丙烷三羧酸*****柠檬酸又名枸橼酸。存在于柠檬、菠萝、葡萄等水果中，此外，天麻、覆盆子、五味子等中药中也有存在。01柠檬酸为无色晶体，常一分子结晶水。易溶于水和乙醇。具有多元羧酸的性质，易与金属离子形成络合物。02柠檬酸与酒石酸、苹果酸一样，广泛用作食品的酸味剂。在食品和医学上用作多价螯合剂，也是化学中间体，临床上，用柠檬酸作矫味剂。许多柠檬酸盐具有特定的生理活性，如：枸橼酸铁铵（抗贫血药），枸橼酸铋钾（抗溃疡药）等。柠檬也可用于与碱性药物成盐，成为溶于水的制剂，如枸橼酸哌嗪（抗蠕虫药）。031、柠檬酸的发酵机制理论产率：106.6%116.6%2C6H12O6+3O22C6H8O7+4H2O能够生产柠檬酸的微生物很多01工业上以淀粉糖为原料直接发酵生产柠檬酸的主要是曲霉属（Aspergillus）菌株02黑曲霉（Aspergillusniger）032、柠檬酸的代谢控制诱变育种（breedingbyinducedmutation）01指通过人工方法处理均匀而分散的微生物细胞群，在促进其突变率显著提高的基础上，采用简便、快速和高效的筛选方法，从中挑选出少数符合目的突变株的过程。01在此过程中，诱变和筛选是两个主要环节。01诱发突变（inducedmutation）01物理因素紫外线（ultravioletlight）X射线和γ射线02化学因素碱基结构类似物与核酸上碱基起化学反应的诱变剂移码诱变剂03投产率多数不宜投产少数适宜投产多数幅度小少数幅度大高产率大多死亡少数存活存活率多数未变少数突变突变率多数负变少数正变正变率诱变育种的基本环节出发菌株计算出诱变诱变育种的基本原则01选择简便有效的诱变剂02挑选优良的出发菌株03处理单细胞或单孢子悬液04选用最适的诱变剂量05充分利用复合处理的协同效应06利用和创造形态、生理与产量间的相关指标07设计高效筛选方案08创造新型筛选方法09黑曲霉的形态突变与柠檬酸产量之间有一定的关系，通过选育形态突变株，有助于柠檬酸高产菌株的获得。例如，选育在葡萄糖培养基上孢子不生长、迟长或者少长的突变株。柠檬酸发酵优良突变株的筛选形态学观察法柠檬酸发酵优良突变株的筛选透明圈法甘薯粉10%琼脂2%碳酸钙0.5%柠檬酸发酵优良突变株的筛选麦芽汁培养基pH指示剂（溴酚蓝0.01%）3、显色圈法柠檬酸发酵优良突变株的筛选01高产柠檬酸的菌株必须在高糖和高柠檬酸浓度的培养基上能够生长，即具备耐受高糖和高柠檬酸的能力。甘薯粉〉15%………..柠檬酸〉20%………..02高渗透压法用以柠檬酸为唯一碳源的培养基，选择菌体不生长或生长微弱的突变株。选育不分解柠檬酸的突变株柠檬酸发酵优良突变株的筛选如：将磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因克隆到高拷贝载体上，使之扩增选育强化CO2固定反应的突变株03如：寡霉素抗性、萘啶酮酸抗性等选育抗药性突变株02如：谷氨酸缺陷型、精氨酸缺陷型等选育某些氨基酸缺陷的突变株01柠檬酸发酵优良突变株的筛选脂类物质脂肪磷脂固醇蜡脂类的代谢与调节第三节脂类代谢与控制含两个或两个以上双键且碳原子数为16-22的直链脂肪酸。如γ－亚麻酸，花生四烯酸，二十二碳六烯酸等。01多不饱和脂肪酸可广泛用于医药、食品、化装品、饲料等领域。02多不饱和脂肪酸是人体不能缺少、自身又不能合成或替代的必需脂肪酸。人体一旦缺乏，首先至关重要的前列腺素PGE1、PGE2、PGE3、就不能合成，免疫、心脑血管生殖内分泌等系统就会出现异常，发生紊乱，从而引起高血脂、高血压、血栓症、动脉粥样硬化、风湿病、糖尿病、皮肤粗糙、加速衰老化等一系列疾病。特别是对脑组织的生长发育相当重要，因为脑重量的20%是由必需脂肪酸组成的。123γ-亚麻酸产生菌：多用被孢霉、毛霉、红教母、小克银汉霉γ-亚麻酸GammalinolenicAcid

（十八碳三烯酸，维生素F，OctadecatrienoicAcid，GLA）01