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实验二
球菌,杆菌化脓性球菌革兰阳性菌:葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌革兰阴性菌:脑膜炎奈瑟菌,淋病奈瑟菌N.gonorrhoeaeN.meningitidisS.pneumoniaestaphylococcusStreptococcus完全溶血、金黄色金黄色葡萄球菌01不溶血、白色表皮葡萄球菌02不溶血、柠檬色腐生葡萄球菌03菌落中等大小、不透明、表面光滑、边缘整齐葡萄球菌鉴别链球菌鉴别菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐G+、链状完全溶血乙型溶血性链球菌不溶血丙型溶血性链球菌草绿色不完全溶血环甲型链球菌肺炎链球菌胆汁溶菌试验-(混浊)+(澄清)脓汁标本病原性球菌的分离鉴定脓汁或喉拭子涂片、革兰染色、镜检血琼脂平板观察菌落特征及溶血情况生化反应、致病力试验及药敏试验由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌,可初步诊断为脑膜炎球菌由泌尿、生殖系统来源的标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌,可初步诊断为淋球菌37℃24h根据菌落特点及涂片检查作出初步判断,然后:01菌落中等大小、完全溶血、不透明、金黄色、G+,葡萄状排列,可能是金黄色葡萄球菌,可进一步做血浆凝固酶试验和甘露醇发酵试验,确定其致病力。02菌落小、半透明、完全溶血、G+、链状,为乙型溶血性链球菌03菌落小、半透明、绿色不完全溶血环,G+、短链状,为甲型溶血性链球菌或肺炎链球菌,通过胆汁溶菌和菊糖发酵试验进一步鉴别。04脓汁标本病原性球菌的分离鉴定取一个载玻片,划分3格,标记1、2、3。在格内分别滴加:兔血浆一滴兔血浆一滴盐水一滴以接种环挑取细菌混悬于液滴中:金黄色葡萄球菌白色葡萄球菌金黄色葡萄球菌立即观察结果。葡萄球菌血浆凝固酶试验克氏双糖铁培养基01尿、靛、动培养基02分析结果03SS平板EMB平板04挑取可疑菌落05玻片凝集试验06粪便07粪便标本肠道杆菌的分离鉴定SS平板-分离肠道病原菌的强选择培养基成分和作用:基础培养基:提供氮源和碳源胆盐、枸橼酸钠、煌绿:可抑制肠道非致病菌的生长,而对肠道致病菌抑制作用弱。乳糖,中性红(,红→橙黄):致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨产生碱性物质→菌落淡黄色;大肠杆菌分解乳糖产酸,菌落呈红色病原菌:小,无色,半透明非致病菌:大,红色EMB(EosinMethylBlue)平板-分离肠道病原菌的弱选择培养基成分和作用:基础培养基:提供氮源和碳源伊红、美蓝:可抑制肠道非致病菌的生长,而对肠道致病菌抑制作用弱。乳糖,伊红、美蓝:致病菌不分解乳糖→菌落无色半透明;大肠杆菌分解乳糖产酸,菌落呈紫黑色病原菌:半透明,无色非致病菌:紫黑色克氏双糖铁培养基接种方法如何观察上层含乳糖部分乳糖发酵:致病菌红色,非致病菌黄色H2S然后观察下层发酵葡萄糖(产酸产气)动力乳糖硫酸亚铁固体葡萄糖半固体指示剂:酚红01020304乳糖葡萄糖硫化氢尿素靛基质动力痢疾杆菌红色+--+/--副伤寒杆菌红色++--+大肠杆菌黄色+--++伤寒杆菌红色++/---+变形杆菌红色++++/-+0506原理:用已知伤寒沙门菌O、H抗原,以及甲型副伤寒、肖氏沙门菌、希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验,测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途:辅助诊断伤寒,副伤寒肥达试验(WidalTest)
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