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饭疏食,饮水,曲肱而枕之,乐亦在其中矣。不义而富且贵,于我如浮云。——《论语》
合浦县人民医院标题:总胆汁酸(TBA)操作规程
文件编号:版本号:1修改号:0
HPXR-JMYKY-YSOP-SH-2025
检验科生效日期:2025年2月1发行部门:质量管量组
编制人:张胜坤审核人:陈伟昭
批准人:张善辉页码:第1页共页
1.检验目的
与胆汁酸校准品配合使用,用于测定血清或者血浆中的总胆汁酸(TBA)含量。
2.测定方法和原理
血清中胆汁酸在3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)及β-硫烟酰胺腺苷二核苷酸氧化型
(Thio-NAD)作用下酸脱氢酶(G-6-PDH)被氧化,生成3-酮类固醇及β-硫烟酰胺腺苷二核
苷酸还原型(Thio-NADH)。生成的3-酮类固醇在3α-HSD及β-烟酰胺腺苷二核苷酸还原型
(NADH)的作用下,生成胆汁酸及β-烟酰胺腺苷二核苷酸氧化型(NAD)。通过酶的循环反应,
微量的胆汁酸被扩增。通过检测生成的Thio-NADH在405nm吸光度变化而求出血清中胆汁
酸的浓度变化。
计算公式如下:
TBA浓度(μmol/L)=ΔA样品/ΔA标准×标准品浓度
3.标本采集与处理
3.1标本种类:请使用新鲜血清或者血浆标本。请勿使用全血标本或者尿液标本。
3.1.1抗凝剂的影响
根据NCCEP7-A方法进行研究表明:抗凝剂肝素(heparin)、柠檬酸钠、草酸铵、氟化钠、
EDTA-2Na,在不超过以下浓度的情况下,不会影响测试结果。
抗凝剂常用单位SI单位
EDTA-2Na0.5%13.4mmol/L
肝素(heparin)0.1%1g/L
柠檬酸钠2.0%77.5mmol/L
草酸铵1.0%70.4mmol/L
氟化钠3.0%714mmol/L
3.2受检者的准备:空腹,采集前静坐5min,如有输液,应在停止输液3min后在另一侧肢
体静脉采集。
3.3静脉采血:除非是卧床病人,一般取坐位从肘静脉采血,使用止血带的时间不超过1min,
士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?——《论语》
穿刺成功后立即松开止血带。
3.4采集:通常用含助凝剂的分离胶真空采血管(黄头管)采集2-3ml血液标本。
3.5患者标本的处理
1)采血后大约40~60分钟完全凝固的血液。以2500~3000rpm的速度(大约1000G),离
心5~10分钟。离心后标本可直接上机。
3.6标本保存条件和稳定性:标本在采集、处理后,立即测定标本。在不能立即测定血清
标本的情况下,应遵循下表的保存条件和稳定期进行保存:
保存方法温度要求稳定性
室温23℃1日内稳定
冷藏4℃3日内稳定
冷冻-20℃
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