真核生物转录后的加工.ppt

4、I类含子的剪接结构特点：（1）5′剪接点和3′剪接点-------U↓……G↓（2）有由保守序列形成的二级结构a、保守序列为5′－P－Q－R－S－3′P与Q互补、R与S互补而形成中部核心结构b、二级结构中还包括内含子与外显子的某一序列互补所形成的二级结构。内部引导序列（interalguidesequence，IGS）。I类含子的二级结构（二）原核生物rRNA前体的加工rRNA前体的加工主要是由内切酶RNaseⅢ负责。首先，P16S和P23S各自的5′和3′都能互补（茎环），RNaseⅢ在茎上交错切割产生了P16S，P23S和P5SrRNA前体；然后，由外切酶进行修正，切除多余的部分，形成成熟的rRNA分子。链内部核苷酸的甲基化3?端加上多聚腺苷酸尾巴（polyAtail）中部剪接除去内含子5?端形成帽子结构（m7GpppNp—）hnRNA转变成mRNA的加工过程包括：三、mRNA前体的加工（一）5′-端加上帽子结构（mGpppNp—）帽子的种类帽子0（Cap-0）m7GpppXpYpm7G7-甲基鸟苷三磷酸帽子1（Cap-1）m7GpppXmpYp第一个核苷酸的2′-O位上产生甲基化（AN6位甲基化）帽子2（Cap-2）m7GpppXmpYmp第二个核苷酸的2′-O位上产生甲基化（A、G、C、U）单细胞真核生物只有Cap-001010203Cap-1是其余真核生物的主要帽子形式Cap-2存在于某些真核生物中0203使mRNA免受核酸酶的降解，增加mRNA的稳定性；有助于mRNA越过核膜，进入细胞质；被蛋白质起始因子识别，使mRNA能与核糖体小亚基结合并开始合成蛋白质。0102032、帽子结构的生物学功能（二）3′-端加上多聚腺苷酸尾巴（polyA）几乎所有真核生物成熟的mRNA末端都有一串约250个腺嘌呤核苷酸尾巴。它们并非模板DNA编码，而是在转录完成时由poly(A)多聚酶合成。加尾位置不在转录物的最末端，而是在接近末端的内部位点。在切除mRNA3末端的一段序列后，再加上多聚腺苷酸。加尾是在核内完成，先于mRNA中段的剪接，和转录终止同时进行。新合成的mRNA的3′-端含两个明显的加尾信号。第一个加尾信号位于poly(A)上游，一致顺序为5′?AAUAAA?3′；第二个加尾信号位于5′?AAUAAA?3′顺序下游约15-24nt位置处，有一段富GU序列，紧随其后通常有一串富U的顺序。5-AAUAAA-----15~24bp----GUGUGUUGGAAUUUUUUGUGU--3如果改变5′?AAUAAA?3′位置，加尾位点改变；缺失，则不发生加尾。富GU序列和紧随其后的富U序列对正常的加尾不可缺一。1、ploy（A）加尾信号02010304提高mRNA在细胞质中的稳定性。作为核糖体的识别信号，使mRNA分子有效翻译。协助mRNA从细胞核向细胞质转运。对基因的表达调控有重要作用。2、poly（A）的生物学功能mRNA的内部甲基化真核生物mRNA分子中有许多甲基化的碱基；具体的甲基化位点还不太清楚；主要是：N6-甲基腺嘌呤（m6A）；推测可能为mRNA的剪切提供信号。12（四）核mRNA前体的剪接（Splicing）真核不连续基因的初级转录产物中，外显子与内含子交替出现----割裂基因（Splitgene）；转录后把内含子切除而把外显子连接起来产生成熟RNA分子的过程，叫RNA剪接（RNAsplicing）。内含子在真核基因中所占的比例很高，甚至超过99%。1、核mRNA内含子剪接位点特征内含子总是由GU开始，以AG结束，其规律称为GU-AG法则（GU-AGrule)或Chambon法则。5′端剪接位点(供位)相邻的保守序列：5′-AG↓GUPuAGU-3′3′端剪接位点(纳位)相邻的保守序列：5′-(Py)nNCAG-3′分枝点保守序列：Py80NPy87Pu75APy95，其中A为百分之百保守，且具有2′-OH。mRNA前体正确剪接所必需的SnRNA一般≤300碱基，包括U1-U6等；在剪接过程中有5种snRNAs参加，它们是U1、U2、U4、U5、和U6；snRNA(smallnuclearRNAs，核内小分子RNA）01在自然状态下，snRNAs与相关的蛋白质形成复合物-SnRNPsnRNP、hnRNA