真核基因表达调控的一般规律.ppt

碱性-螺旋-环-螺旋(bHLH)真核基因转录调控的主要模式概述信息传递→反式作用因子的活性外界环境变化时单细胞生物——直接作出反应多细胞生物——通过细胞间复杂的信息传递系统来传递信息，从而调控机体活动。靶细胞产生生物学效应01特定的细胞释放信息物质信息物质经扩散或血液循环到达靶细胞02与靶细胞的受体特异性结合受体对信息进行转换并启动细胞内信使系统03跨膜信息传递的一般步骤：细胞间信息物质：是由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质的统称，又称作第一信使。如生长因子、细胞因子、胰岛素等1第二信使(secondarymessenger)：在细胞内传递信息的小分子物质，如：Ca2+、IP3、DAG、cAMP、cGMP等。2受体：是细胞膜上或细胞内能特异识别信息物质并与之结合的成分。它是一种能把识别和接受的信息正确无误地放大并传递到细胞内部、进而引起生物学效应的特殊蛋白质，个别是糖脂。01配体(ligand)：能与受体特异性结合的信息物质。02存在于细胞膜上的受体，根据其结构和转换信号的方式又分为三大类：离子通道受体、G蛋白偶联受体、跨膜蛋白激酶受体。01膜受体(membranereceptor)02胞内受体(endocellularreceptor)01高度可变区02位于N端，具有转录活性03DNA结合区04含有锌指结构05激素结合区06位于C端，结合激素、热休克蛋白，使受体二聚化，激活转录07配体：类固醇激素、甲状腺素等功能：多为反式作用因子，当与相应配体结合后，能与DNA的顺式作用元件结合，调节基因转录。（二）信息传递途径A激酶（PKA）：依赖于cAMP的蛋白激酶。cAMP-Ａ激酶途径膜受体介导的信息传递DNA甲基化抑制基因转录的机理DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，即抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。按功能状态的不同可将染色质分为活性染色质和非活性染色质。活性染色质是指具有转录活性的染色质；非活性染色质是指没有转录活性的染色质。活性染色质五、染色质的结构与基因表达调控活性染色质由于核小体发生构象的改变，往往具有疏松的染色质结构。“灯刷型”染色体真核细胞中基因转录的模板是染色质而不是裸露的DNA，因此染色质呈疏松或紧密结构，即是否处于活化状态是决定RNA聚合酶能否有效行使转录功能的关键。疏松的染色质结构便于转录调控因子与顺式调控元件结合和RNA聚合酶在转录模板上滑动。活性染色质上具有DNaseI超敏感位点。每个活跃表达的基因都有一个或几个超敏感位点，大部分位于基因5′端启动子区域。活性染色质的结构特点活性染色质上具有核基质结合区（matrixattachmentregion，MAR）MAR一般位于DNA放射环或活性转录基因的两端。在外源基因两端接上MAR，可增加基因表达水平10倍以上，说明MAR在基因表达调控中有作用，是一种新的基因调控元件。活性染色质上具有基因座控制区。0102第四节真核生物转录水平上的基因表达调控真核基因转录真核基因转录调控的主要模式真核基因转录（一）真核基因结构“基因”的分子生物学定义：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。（二）顺式作用元件定义：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。例：启动子、增强子、沉默子等（1）启动子：在DNA分子中，RNA聚合酶能够识别、结合并导致转录起始的序列。核心启动子和上游启动子元件是在基因转录起始位点（+1）及其5’上游大约100~200bp以内的一组具有独立功能的DNA序列，每个元件长度大约7~20bp,是决定RNA聚合酶转录起始点和转录频率的关键元件。核心启动子：确定转录起始位点并产生基础水平的转录上游启动子元件：通过TFⅡD复合物调节转录起始的频率，提高转录效率增强子：指能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。SV40的转录单元上发现，转录起始位点上游约200bp处有两段长72bp的正向重复序列。增强子特点：①增强效应十分明显，一般能使基因转录频率增加10-200倍②增强效应与其位置和取向无关，不论增强子以什么方向排列（5‘→3’或3‘→5’），甚至和靶基因相距3kb，或在靶基因下游，均表现出增强效应；大多为重复序列，一般长约50bp，适合与某些蛋白因子结合。其内部常含有一个核心序列：（G）TGGA/TA/TA/T（G），该序列是产生增强效应时所必需的；增强效应有严密的组织和细胞特异性，说明增强子只有与特定的蛋白质（转录因子）相互作用才能