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QuEChERS-_液相色谱串联质谱法测定水果中二氰蒽醌残留量

一、1.引言

(1)随着人们生活水平的提高和食品安全意识的增强，对农产品中农药残留的检测要求日益严格。二氰蒽醌作为一种高效的杀虫剂，在我国农业生产中有着广泛的应用。然而，二氰蒽醌的过量使用和残留问题，不仅会影响农产品的品质，还可能对人体健康造成潜在威胁。因此，建立准确、高效、便捷的二氰蒽醌残留检测方法，对于保障食品安全和人体健康具有重要意义。

(2)液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）因其灵敏度高、选择性好、检测速度快等优点，已成为农药残留检测领域的主流技术。QuEChERS（Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged,andSafe）是一种基于固相萃取（SPE）的样品前处理技术，具有操作简便、成本低廉、回收率高等特点。将QuEChERS技术与LC-MS/MS联用，能够有效提高二氰蒽醌残留检测的准确性和灵敏度，为农产品质量监管提供有力技术支持。

(3)本研究旨在建立一种基于QuEChERS-LC-MS/MS方法的二氰蒽醌残留检测方法，通过对水果样品进行前处理和检测，实现对二氰蒽醌残留量的准确测定。该方法不仅能够满足实际生产中对二氰蒽醌残留检测的需求，还具有操作简便、成本低廉、检测速度快等优势，为我国农产品质量安全监管提供了一种实用、高效的技术手段。

二、2.方法原理与流程

(1)本方法采用QuEChERS技术对水果样品进行前处理。首先，将水果样品匀浆后加入乙腈和醋酸铵溶液，通过涡旋振荡使样品中的二氰蒽醌等目标物溶解并转移到SPE小柱上。然后，使用乙腈-水溶液洗脱小柱，将目标物富集在SPE小柱上。最后，将富集的目标物用乙腈-水溶液洗脱，并通过氮气吹扫至近干，再定容至适宜体积，以便进行液相色谱串联质谱检测。

(2)液相色谱部分采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离技术。流动相通常由水相和有机相组成，其中水相常加入一定浓度的醋酸或磷酸盐调节pH值，有机相通常为乙腈或甲醇。样品在色谱柱中通过梯度洗脱，不同极性的化合物在色谱柱中的保留时间不同，从而实现分离。

(3)质谱部分采用电喷雾电离（ESI）技术，将待测化合物电离成离子形式，并通过四级杆质谱（Q-MS）进行检测。通过选择合适的扫描方式和多反应监测（MRM）模式，实现对目标化合物的高灵敏度和高选择性检测。在MRM模式下，选择两个特征离子对进行监测，通过比较这两个离子对的信号强度比，可以实现对目标化合物的定量分析。

三、3.材料与仪器

(1)实验室中使用的材料包括水果样品（如苹果、梨、柑橘等），乙腈（色谱纯，≥99.9%），醋酸铵（分析纯，≥99.7%），无水硫酸钠（分析纯，≥99.0%），C18固相萃取小柱（6cc/500mg，Waters公司），氮气吹扫装置（ThermoFisherScientific公司），以及QuEChERS手动加样装置（Waters公司）。以苹果为例，每个样品约需50g，用于提取和检测。

(2)仪器设备方面，液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）是本实验的核心设备，采用Waters公司ACQUITYUPLCI-Class系统与Waters公司XevoTQ-S质谱仪。该系统具备高灵敏度、快速扫描能力和多反应监测（MRM）功能，适用于复杂样品中痕量分析。此外，实验中还使用了高效液相色谱仪（Agilent1260Infinity），分析天平（SartoriusBP211D，感量0.1mg），涡旋振荡器（IKAMS3digital），以及超声波清洗器（Branson3510）等。

(3)样品前处理过程中，固相萃取小柱的使用至关重要。C18固相萃取小柱具有高吸附能力和良好的重现性，适用于多种农药残留的富集和净化。在本实验中，C18小柱的容量为6cc，可处理约10-20mL样品溶液。实验过程中，使用无水硫酸钠作为干燥剂，以去除样品溶液中的水分，提高检测灵敏度。此外，实验中使用的乙腈和醋酸铵溶液均需经过0.22μm滤膜过滤，以去除可能存在的杂质。

四、4.样品前处理与实验步骤

(1)样品前处理步骤如下：首先，将采集的水果样品进行匀浆处理，以增加样品的均一性。具体操作为，将50g水果样品置于匀浆杯中，加入10mL乙腈和5g无水硫酸钠，使用匀浆机以高速匀浆2分钟。然后，将匀浆后的混合物转移到50mL离心管中，以4000r/min离心5分钟，取上清液。

(2)接下来，将上清液转移至C18固相萃取小柱中，使用5mL乙腈-水溶液（1:1，v/v）进行预淋洗，以确保小柱的活化。随后，使用5mL乙腈-水溶液（1:1，v/v）进行洗脱，洗脱液收集于10mL离心管中。将收集的洗脱液在50℃下氮气吹扫至近干，确保残留体积不超过0.5mL。最后，