《电泳分离概述》课件.pptVIP

**************什么是电泳分离凝胶电泳分离根据分子大小分离生物大分子，如蛋白质和核酸。毛细管电泳分离利用毛细管作为分离通道，可分离蛋白质、核酸、离子等。等电聚焦电泳根据蛋白质的等电点进行分离，可以实现高分辨率分离。二维电泳分离结合等电聚焦和SDS，可以实现更高分辨率的分离。电泳分离的历史发展11930年代最早的电泳分离技术出现，主要用于蛋白质分离和分析。21940年代纸电泳和琼脂糖凝胶电泳的出现，电泳技术开始得到广泛应用。31960年代聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的开发，为蛋白质和核酸分离提供了更高分辨率的技术。41970年代等电聚焦电泳和二维电泳的出现，进一步提高了电泳分离的灵敏度和分辨率。51980年代毛细管电泳技术问世，并逐渐应用于蛋白质、核酸、药物和生物分子的分析。61990年代至今高性能电泳技术，如芯片电泳和微流控电泳的开发，为电泳技术带来了新的发展方向。电泳分离的基本原理1电荷差异不同分子带电荷不同，在电场中会产生不同的迁移速度。2尺寸和形状分子尺寸和形状影响其在凝胶中的迁移速度，小的分子更容易穿过凝胶。3电场强度电场强度越高，离子迁移速度越快。4介质阻力凝胶的孔径会阻碍大分子的移动，导致它们迁移速度较慢。离子的电泳移动带正电荷的离子在电场中向负极移动带负电荷的离子在电场中向正极移动离子在电场中的移动速度受多种因素影响，例如电场强度、离子大小、离子形状和溶液的粘度等。不同离子的电泳迁移速度不同离子的电泳迁移速度受其电荷、大小、形状和电场强度的影响。电泳迁移速度越快，离子在电场中的移动速度越快，从而在凝胶中移动的距离也更远。电场强度与离子迁移速度的关系电场强度电场强度是指单位电荷在电场中受到的力，是电场强弱的标志。离子迁移速度离子的迁移速度是指离子在电场中移动的速度，它与电场强度、离子的电荷量和摩擦系数有关。正比关系在电场强度一定的情况下，离子的迁移速度与电场强度成正比。影响因素除了电场强度外，离子的迁移速度还受离子大小、形状、溶液粘度和温度等因素的影响。电泳分离技术的应用领域生物医学研究蛋白质鉴定、抗体分析、基因表达分析等药物研发药物纯化、药物效力检测、药物代谢研究等食品安全检测食品成分分析、食品过敏原检测、食品添加剂检测等环境监测水质污染监测、土壤污染监测、空气污染监测等凝胶电泳分离凝胶电泳分离是蛋白质分离的常见方法，使用聚丙烯酰胺凝胶作为分离介质。该方法利用蛋白质在电场中的迁移速度差异，将不同分子量的蛋白质分离。毛细管电泳分离毛细管电泳(CE)是一种高效分离技术，适用于分析和分离各种样品，包括蛋白质、肽、核酸、离子、药物等。CE利用毛细管中电场驱动带电粒子在缓冲液中移动，根据迁移速度的不同进行分离，并通过检测器检测。二维电泳分离原理利用蛋白质的等电点和分子量差异进行分离。首先，根据蛋白质等电点进行等电聚焦，然后根据分子量进行SDS分离。结果最终得到一个二维电泳图谱，每个点代表一种蛋白质，可以根据其位置确定其等电点和分子量。优势可以同时分离和分析多种蛋白质，提高了分离效率和分辨率，能更有效地进行蛋白质组学研究。免疫亲和电泳分离免疫亲和电泳分离是一种利用抗原抗体特异性结合来分离和纯化目标蛋白的技术。该技术将抗体固定在凝胶上，通过电泳将样品蛋白分离，目标蛋白与固定抗体特异性结合，其他蛋白则不会结合，从而实现目标蛋白的分离。免疫亲和电泳分离的应用范围广泛，例如，可以用于研究蛋白质与抗体的相互作用，分离和纯化特定蛋白，以及诊断疾病等。等电聚焦电泳分离等电聚焦电泳是根据蛋白质的等电点不同进行分离的一种电泳技术。蛋白质在特定的pH梯度中迁移，直到达到其等电点，此时蛋白质不再移动。等电聚焦电泳可以用于分离蛋白质混合物，并用于确定蛋白质的等电点。该技术已被广泛应用于蛋白质组学、生物化学和临床诊断等领域。等电点分离的应用蛋白质组学研究等电点分离用于蛋白质组学分析，通过等电点差异分离蛋白质，识别和定量蛋白质，帮助研究人员了解蛋白质的功能和相互作用。生物制药等电点分离在生物制药领域应用广泛，用于分离纯化蛋白质药物，例如抗体和酶，保证药品的质量和纯度。食品安全等电点分离可以用于检测食品中的蛋白质成分，例如识别过敏原，鉴别肉类来源，确保食品安全。临床诊断等电点分离用于检测疾病标志物，例如肿瘤标志物，帮助医生诊断和监测疾病，提高诊断准确率。蛋白质电泳分离基本步骤1样品制备收集样品并去除干扰物质2电泳分离根据蛋白质大小和电荷进行分离3染色和脱色使蛋白质条带可视化4凝胶扫描和分析分析蛋