2024版高考题分类训练专题-专题21基因工程和生物技术的安全性与伦理问题题组4.docxVIP

专题二十一基因工程和生物技术的安全性与伦理问题

题组四

1.[2023浙江6月选考，14分]赖氨酸是人体不能合成的必需氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含量很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含量。回答下列问题：

（1）植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式属于负反馈调节。根据这种调节方式，在培养基中添加一定浓度的赖氨酸类似物（2分）,用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得再生植株。

[解析]通过抑制或减弱一开始的变化，维持物质含量稳定，这种调节方式属于负反馈调节。人为添加一定浓度的赖氨酸类似物，使不抗赖氨酸类似物的细胞死亡，而抗赖氨酸类似物的细胞突变体能够存活。

（2）随着转基因技术与动物细胞工程结合和发展，2011年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为：

①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目的基因）,可通过检索生物信息数据库/遗传序列数据库（2分）获取其编码序列，用化学合成法制备得到。再将获得的目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。

[解析]可通过检索生物信息数据库（或遗传序列数据库）获取目的基因的编码序列。

②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞（BEF）。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，与BEF膜发生融合,表达载体最终进入细胞核，发生转化。

[解析]脂质体由磷脂等构成，脂质体可以与牛胚胎成纤维细胞的细胞膜发生融合，从而使表达载体进入细胞，最终进入细胞核，发生转化。

③核移植。将转基因的BEF作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去核后作为受体细胞。将两种细胞进行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合，同时起到了激活重组细胞发育的作用。

[解析]卵母细胞去核后作为受体细胞。经核移植的重组细胞需利用电刺激进行胚激活。

④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至早期囊胚，植入代孕母牛子宫角，直至小牛出生。

[解析]将重组细胞体外培养至早期囊胚后，可移植至代孕母牛子宫角。

⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以转基因牛耳组织细胞为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA水平检测：从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA,对总RNA进行DNA酶处理，以去除DNA污染，再经逆转录形成cDNA,并以此为模板,利用特定引物扩增目的基因片段。结果显示目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织细胞内表达，原因是什么？构建的表达载体含乳腺特异性启动子，使目的基因仅在乳腺细胞中表达（2分）。

[解析]DNA水平检测的目的是检测转基因牛中是否含有目的基因。分析可知，可以转基因牛耳组织细胞作为阳性对照。进行RNA水平检测时，需利用DNA酶（DNA水解酶）处理总RNA，以去除DNA污染。RNA经逆转录形成的cDNA可作为PCR扩增的模板，通过PCR技术可获取大量的目的基因片段。目的基因只在转基因牛乳腺细胞中表达的原因是在构建基因表达载体时，将目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连接，构建出了乳腺专一表达载体，该表达载体中的特异性启动子使目的基因仅在乳腺细胞中表达，而不会在其他细胞中表达。

【考情速递】

把知识形成过程作为考试内容

高考生物试题情境来源丰富，从设计实验方案、分析实验结果等多个维度考查考生的实验探究能力，引导考生注重科学思维素养的培养。该题在考查阳性对照和阴性对照的设置以及对实验结果的分析和讨论等的同时，引导考生提高运用生物技术解决实际问题的意识，探究过程就是知识形成过程，亦是考试内容，符合深度学习的趋势。

2.[2022天津，10分]研究者拟构建高效筛选系统，将改进的苯丙氨酸合成关键酶基因P1导入谷氨酸棒状杆菌，以提高苯丙氨酸产量。

（1）如图是该高效筛选系统载体的构建过程。载体1中含有KanR（卡那霉素抗性基因）和SacB两个标记基因，为去除筛选效率较低的SacB,应选择引物1和4，并在引物的55/3端引入Xho

[解析]据题中信息知，选择引物1和4扩增出来的片段不含SacB基因，故为去除筛选效率较低的SacB基因，应选择引物1和4。PCR时，引物与单链DNA结合后，从引物的3端开始延伸，故应在引物的5端引入Xh

（2）PCR扩增载体3中筛选效率较高的标记基因RpsL（链霉素敏感基因）时，引物应包含XhoⅠ（2分）（EcoRⅠ/HindⅢ/XhoⅠ

[解析]分析题图可