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专题二十一基因工程和生物技术的安全性与伦理问题
题组三
一、选择题
1.[2023湖北,2分]用氨苄青霉素抗性基因AmpR、四环素抗性基因TetR作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA
A.若用HindⅢ
B.若用PνuⅠ酶切,在含Tet(四环素)培养基中的菌落,不一定含有目的基因
C.若用SphⅠ酶切,可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否
D.若用SphⅠ酶切,携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落
[解析]若用HindⅢ酶切质粒和含有目的基因的DNA片段,用DNA连接酶将两者连接成重组质粒,目的基因和质粒有正向连接和反向连接两种连接形式,因此,目的基因转录的产物可能不同,A正确;若用PvuⅠ酶切,会破坏氨苄青霉素抗性基因,在含Tet(四环素)培养基中的菌落可能是含有目的基因的重组质粒,也可能是质粒自身连接的普通质粒,因此,在含Tet(四环素)培养基中的菌落,不一定含有目的基因,B正确;若用SphⅠ酶切,由于重组质粒和普通质粒的碱基对数不同,因此可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否,C正确;若用SphⅠ酶切,会破坏四环素抗性基因,氨苄青霉素抗性基因不受影响,因此携带目的基因的受体菌能在含Amp(氨苄青霉素)的培养基中形成菌落,不能在含Tet(四环素)的培养基中形成菌落,D
【高分必备】图解限制酶的选择依据
(1)根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类
①应选择位于目的基因两端的限制酶,如图甲中可选择PstⅠ。
②不能选择目的基因内部的限制酶,如图甲中不能选择SmaⅠ。
(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类
①通常选择与切割目的基因相同的限制酶,以确保出现相同的黏性末端,如图乙中的PstⅠ。
②在只有一种标记基因时,选择的限制酶不能破坏标记基因,如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因。
2.[2023浙江6月选考,2分]某研究小组利用转基因技术,将绿色荧光蛋白基因GFP整合到野生型小鼠Gata3基因一端,如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只,交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型,设计了引物1和引物2用于PCR扩增,PCR
图甲
图乙
下列叙述正确的是(B)
A.Gata3基因的启动子无法控制GFP基因表达
B.翻译时先合成Gata3蛋白,再合成GFP
C.2号条带的小鼠是野生型,4号条带的小鼠是Gata3-GFP
D.若用引物1和引物3进行PCR,能更好地区分杂合子和纯合子
[解析]由图甲可知,Gata3基因与GFP基因共用一个启动子,且由题干可知两基因能正常表达出相关蛋白质,A错误;由于启动子在左侧,基因在右侧,转录基因时,先转录Gata3基因,再转录GFP基因,由于转录和翻译的方向均是沿mRNA的5→3,因此翻译时先合成Gata3蛋白,再合成GFP蛋白,B正确;由图乙可知,大片段包含GFP基因编码区片段,小片段不包含GFP基因编码区片段,则2号小鼠是Gata3-GFP基因纯合子,4号小鼠是野生型,C错误;若用引物1和引物3进行PCR,杂合子和Gata3-GFP
【考情速递】
运用新技术解决常规问题
该题灵活运用电泳技术鉴定转基因小鼠的基因型,试题新颖,反映了生物技术进步能够帮助人们解决实际问题,同时能帮助考生转变思维习惯,多角度认识常规问题,并采用多种方法解决它。
二、非选择题
3.[2023广东,14分]种子大小是作物重要的产量性状。研究者对野生型拟南芥2n=10进行诱变,筛选到一株种子增大的突变体。通过遗传分析和测序,发现野生型DA1基因发生一个碱基G到
回答下列问题:
(1)拟采用农杆菌转化法将野生型DA1基因转入突变体植株,若突变体表型确由该突变造成,则转基因植株的种子大小应与野生型(1分)植株的种子大小相近。
[解析]据题干信息可知,突变体是由野生型DA1基因发生隐性突变形成的,采用农杆菌转化法将野生型DA1基因转入突变体植株,若突变体表型确由隐性突变造成,由于转入的基因为显性基因,则转基因植株的种子大小应与野生型植株的种子大小相近。
(2)用PCR反应扩增DA1基因,用限制性核酸内切酶对PCR产物和Ti质粒(1分)进行切割,用DNA连接酶将两者连接。为确保插入的DA1基因可以正常表达,其上下游序列需具备启动子和终止子(2分)。
[解析]构建基因表达载体时,需要用限制性核酸内切酶对经过PCR扩增的DA1基因和作为运载体的Ti质粒进行切割。为确保插入的DA1基因可以正常表达,DA1基
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