《动物细胞融合与单克隆抗体》精品课件 (1).ppt

诱导融合筛选培养杂交瘤细胞（B-瘤细胞）克隆化培养抗体检测多次筛选足量单一类型杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔体内培养单克隆抗体单克隆抗体制备流程图B淋巴细胞骨髓瘤细胞小鼠免疫B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞未融合细胞单克隆抗体的优点：纯度高，特异性强，灵敏度高，产量大选择性培养基1、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。思考讨论诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点注射抗原的目的是什么大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法两种亲本细胞融合的混合物中可能有多种类型细胞，筛选的目的是获得优良的杂种细胞。原理杂种细胞的筛选1）亲本2）同核体：同源原生质体的融合体3）异核体：非同源的原生质体的融合体4）多核体：含有双亲不同比例核物质的融合体5）异胞质体：具有不同胞质来源的杂合细胞。6）核质体：有细胞核而带有少量细胞质的亚原生质体动物细胞的筛选方式（特定培养基）：1）利用抗药性筛选系统：利用生物细胞对药物敏感性差异筛选杂种细胞。2）营养互补筛选系统：细胞在缺乏一种或几种营养成分时，不能生长繁殖，即营养缺陷型细胞。利用两种亲本细胞营养互补作用原理可以筛选杂种细胞。3）温度敏感突变型杂种细胞的筛选：一般的培养细胞能在32度到40度的范围内生长，但温度敏感突变型的细胞能在高温或低温下生长。由此筛选杂种细胞。①作为诊断试剂单克隆抗体的应用优点：准确、高效、简易、快速②用于治疗疾病和运载药物（主要用于癌症治疗，也可运载药物，如“生物导弹”）（导向作用，作为载体，生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）（位置准确、疗效高、副作用小）两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势1.动物细胞工程技术的基础是（）A．动物细胞融合 B．胚胎移植C．动物细胞培养D．核移植C2.动物细胞融合和植物原生质融合决定于（）

A.细胞膜的流动性B．细胞膜的选择透过性

C.细胞质的流动性D．细胞质酶的活性A3.只能使动物细胞融合的常用诱导方（）

A．PEGB．灭活的病毒C．电刺激D．离心B4.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用氯化钙作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体D.该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体B5．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A．结果是相同的B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同B6.“生物导弹”是指（）A．单克隆抗体B．产生特定抗体的B淋巴细胞C．杂交瘤细胞D．在单克隆抗体上连接抗癌药物D7.研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C．抗癌物质在克隆细胞中大量合成D．单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合D退出**新课导入学习目标新知探究课堂小结随堂测试新课导入学习目标2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体1、抗体是由何种细胞产生的？浆细胞（效应B细胞）2、抗体是如何产生的？抗原刺激B淋巴细胞增殖分化成浆细胞3、一种B淋巴细胞能产生几种抗体？每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体1.通过观察图片、阅读文本，能够了解动物细胞融合的原理、过程和意义。2.通过师生交流、图像分析，能够理解单克隆抗体制备的过程和应用动物单个细胞的获得动物细胞虽然没有细胞壁，但细胞间的连接方式多样而复杂，在进行有效的细胞融合之前，也必需获得单个分散的细胞。动物细胞融合1细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合受精作用指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。结果：形成单核的杂交细胞原理：细胞膜的流动性诱导方式物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙