菌种及培养基灭菌.ppt

二、分批灭菌分批灭菌的阶段灭菌过程中，N/N0是灭菌程度的主要指标，而N0是培养基初始杂菌浓度，N表示灭菌后的杂菌浓度，但要求绝对无菌很难做到，但可以这样定义N：灭菌一千罐培养基存活的孢子数为1。发酵罐在进行实罐灭菌时，是典型的分批灭菌过程，全过程包括升温、保温、降温三个阶段。孢子受热死亡规律符合–dN/dt=kNlnN/N0=-ktlnN0/N=ln（N0/N1×N1/N2×N2/N）=lnN0/N1+lnN1/N2+lnN2/Nt=1/klnN0/NLgk=-14845/T+36.127例题：某发酵罐，内装培养基40m3,在121℃下进行分批灭菌。设每毫升培养基中含耐热芽孢为107个，求理论灭菌时间？假如培养基从100℃升到121℃需要20分钟时间，考虑这一阶段的灭菌效果，求灭菌时间。灭菌时间的计算分批灭菌的计算分批灭菌的T-t过程曲线不是任意给定的，它决定于加热方式、换热面积、传热系数，换热介质的温度及培养基的重量等多种因素。解：(1)N0=40×106×107=4×1014个N=0.001个Lgk=-14845/T+36.127=-14845/394+36.127=-1.55k=0.0281s-1t=1/klnN0/N=1/0.0281ln4×1014/0.001=1442.6s=24min100110120温度从100℃升到121℃时微生物由N0降到Np,k是温度的函数∫T1kdT=0.128K/sKm=0.128/(394-373)=0.0061s-1单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。Np=N0/(ekmtp)=4×1014/e0.0061×20×60=2.65×1011个从而t=19.7min空气蒸汽蒸汽蒸汽Q1Q2Q3Q4分批灭菌的操作:分批灭菌在所用的发酵罐中进行。将培养基在配料罐中配制好，通过专用管道用泵打人发酵罐，开始灭菌。一般有空气管路和排气管路，取样用的取样管道，放料用的出料管道，接种管道，消沫剂管道，补料管道等。发酵罐传热用的夹套或蛇管，因采用间壁传热而与发酵罐内部不相通。在进行培养基灭菌之前，通常先把发酵罐的空气分过滤器灭菌并用空气吹干。进料完毕后，开动搅拌以防料液沉淀。然后开启夹套蒸汽阀，缓慢引进蒸汽，使料液预热升温至80℃左右后关闭夹套蒸汽阀门。开3路(空气、出料、取样)进汽阀，开排气阀，包括小管子(进料管、补料管、接种管排气阀)。当升温至110℃左右，控制进出汽阀门直至121℃(表压0．1MPa)开始保温，保温一般为30min。保温结束后，关闭过滤器排气阀、排汽阀、进汽阀。关闭夹套下水道阀，开启冷却水进回水阀。待罐压低于过滤器压力时，开启空气进气阀引入无菌空气。随后引入冷却水，将培养基温度降至培养温度。3影响培养基灭菌的其他因素培养基成分：脂肪、糖类及一定浓度的蛋白质会增加微生物的耐热性。pH:pH6-8，微生物最耐热。培养基中的固体颗粒：颗粒小灭菌容易，颗粒大灭菌难。泡沫：因为泡沫传热较难。菌效果和营养成分的保存（一）连续灭菌的流程1、连续灭菌的优点（1）培养基的受热时间短，能有效保存营养成分。（2）生产效率高（3）蒸汽用量平稳，但蒸汽压力一玫要求高于5*105Pa(表压)。2、缺点（1）连续灭菌设备比较复杂，投资较大。培养基采用连续灭菌时，（2）发酵罐应在连续灭菌开始前先进行空罐灭菌，以容纳经过灭菌培养基。（3）灭菌过程中容易出现返混现象。三、连续灭菌单击此处可添加副标题单击此处添加大标题内容第一章菌种及培养基灭菌第一节菌种及其扩大培养微生物工业用菌种微生物工业对菌种的要求能在廉价原料制成的培养基上迅速生长和生成所需的代谢产物产量高的菌种；可以在要求不高、易于控制的培养条件下(糖浓度、温度、pH值、溶解氧、渗透压等)迅速生长和发酵，且所需的酶活性高，特别是在华南地区建厂，夏季气温炎热，宜选择耐高温的菌种；生长速度和反应速度较快，发酵周期较短菌株；1根据代谢控制的要求，选择单产高的营养缺陷型突变菌株或调节突变菌株或野生菌株；2选择抗噬菌体能力强的菌株，使不易感染噬菌体；3菌种纯粹，不易变异退化，以保证发酵生产和产品质量的稳定性；4菌体不是病源菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素