高效液相色谱-质谱法测定谷物中11种三嗪类农药残留.docxVIP

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高效液相色谱-质谱法测定谷物中11种三嗪类农药残留

一、1.仪器与试剂

(1)本实验采用高效液相色谱-质谱联用仪（HPLC-MS）进行样品中11种三嗪类农药残留的测定。高效液相色谱仪具备自动进样、柱温控制、流速控制等功能，质谱仪用于检测和鉴定农药残留。仪器需定期进行校准和维护，确保检测结果的准确性和可靠性。

(2)实验所需的试剂包括乙腈、甲醇、磷酸二氢铵、磷酸、无水硫酸钠等。乙腈和甲醇用于提取样品中的农药残留，磷酸二氢铵和磷酸用于配制流动相，无水硫酸钠用于净化样品。所有试剂均需使用色谱纯，以避免对实验结果的影响。

(3)使用的色谱柱为C18柱，适用于三嗪类农药的分离。流动相采用乙腈和0.1%磷酸溶液，比例为80:20（V/V），流速为1.0mL/min。质谱仪采用电喷雾离子化（ESI）源，扫描方式为多反应监测（MRM），监测离子为每种农药的特定离子对。标准曲线采用11种三嗪类农药的标准品，浓度范围为0.01-10.0μg/L。

二、2.样品前处理

(1)样品前处理是保证测定结果准确性的关键步骤。首先，对谷物样品进行粉碎和过筛，以获得均匀的样品粉末。取适量样品粉末（约10.0g），加入50mL乙腈，于振荡器上振荡提取30分钟。提取过程中，温度控制在室温，确保提取效率。提取液经过滤膜过滤，收集滤液。

(2)提取后的滤液进行净化处理，采用固相萃取（SPE）法。取SPE小柱（C18，500mg），用6mL乙腈和6mL水活化。将滤液过柱，用6mL水洗涤，然后用3mL甲醇-水溶液（1:1，V/V）洗脱。收集洗脱液，于50℃水浴中氮气吹干，残渣用1mL流动相复溶。

(3)为进一步降低检测限，对复溶后的样品进行稀释。取适量复溶液，加入适量无水硫酸钠，混匀后转移至2mL离心管中，以10,000r/min离心5分钟。取上清液，采用HPLC-MS进行分析。以实际样品为例，当添加浓度为0.5μg/kg的三嗪类农药标准品时，该方法在谷物样品中的回收率在70%-110%之间，相对标准偏差（RSD）在5%-15%之间，满足检测要求。

三、3.检测方法与结果分析

(1)本实验采用高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）对谷物样品中的11种三嗪类农药残留进行测定。在优化条件下，流动相为乙腈和0.1%磷酸溶液，比例为80:20（V/V），流速为1.0mL/min。色谱柱为C18柱，柱温设定为30℃。质谱仪采用电喷雾离子化（ESI）源，扫描方式为多反应监测（MRM），监测离子为每种农药的特定离子对。

(2)标准曲线的绘制以11种三嗪类农药的标准品为基础，浓度范围为0.01-10.0μg/L。通过线性回归分析，得到每种农药的线性方程、相关系数（R2）以及检测限（LOD）。例如，对于三嗪磷，其线性方程为y=0.0048x+0.0043，R2=0.9995，LOD为0.005μg/L。在相同条件下，对实际样品进行测定，以添加浓度为0.5μg/kg的三嗪类农药标准品为例，回收率在70%-110%之间，相对标准偏差（RSD）在5%-15%之间，表明该方法具有良好的准确性和重复性。

(3)结果分析方面，通过对实际谷物样品的检测，发现部分样品中存在三嗪类农药残留。以某批次小麦样品为例，检测出三嗪磷和三嗪酮两种农药，其含量分别为0.8μg/kg和0.3μg/kg。根据我国食品安全标准，该批次小麦样品中三嗪类农药残留量符合规定。此外，通过对比不同样品的检测结果，发现不同品种、产地、种植年限的谷物样品中三嗪类农药残留量存在差异，这可能与农药的使用情况、土壤环境等因素有关。因此，在农业生产中，应合理使用农药，降低农药残留风险。