细菌革兰氏染色.ppt

实验二

细菌革兰氏染色一、实验目的01添加标题学习微生物制片、染色的基本技术02添加标题掌握细菌革兰氏染色及无菌操作技术03添加标题进一步观察细菌的基本形态二、实验原理C.Gram（革兰）于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。012、用碘溶液进行媒染，其作用是提高染料和细03涂片进行复染。例如沙黄，它使原来无色的革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革兰氏阳性细菌继续保持深紫色4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对02仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细胞呈无色。3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后革兰氏染色用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染三、实验材料菌种：大肠杆菌（E.C）、枯草杆菌（B.S）染料：结晶紫、复红、碘液等材料：95%酒精等涂片—风干—固定—初染—水洗—媒染—水洗—脱色—水洗—复染—水洗—干燥—镜检四、实验方法（一）革兰氏染色菌悬液涂片干燥滴加无菌水固定取菌苔涂片SmearpreparationHeatfixingcrystalvioletstainwashwithwaterStainingCounterstainwithSafranin注意事项：在涂片时不可过厚，否则在染色脱色时，都不易均匀，固定时，不可过热，以载玻片不烫手为宜。严格掌握脱色程度，是革兰氏染色的关键步骤。如脱色时间太长，阳性菌会误为革兰氏阴性菌，时间不足，革兰氏阴性菌会误为革兰氏阳性菌。在镜检时，以分散开的菌体的革兰氏染色反应为准。设定阴性和阳性对照，确保实验的可靠性。五、思考题03当对未知菌进行革兰氏染色时，怎样能证明你的染色技术和结果的正确性？02做革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚？革兰氏染色成败的关键一步是什么？01讲述革兰氏染色的原理，并指出E.C和B.S分别属于革兰氏阳性或阴性？实验三

真菌形态观察及

微生物菌落形态比较

一、实验目的添加标题学习自制水浸片观察真菌形态的方法01添加标题观察丝状真菌和酵母菌的形态02添加标题比较细菌、真菌和放线菌的菌落形态03二、实验原理真菌形态结构比细菌复杂。习惯上，真菌可分为酵母菌和霉菌。霉菌由粗大、有隔或无隔分支状菌丝构成，菌丝分为基内菌丝、气生菌丝。气生菌丝特化结构上产生多种无性、有性孢子，孢子着生部位、排列方式以及孢子形态可作为真菌鉴定的重要依据。1、根霉——菌丝特化形成假根等特化菌丝1、根霉——孢囊孢子（无性繁殖）2、曲霉、青霉——分生孢子（无性繁殖）3、犁头霉——接合孢子（有性繁殖）4、酵母菌酵母菌是单细胞构造，个体形态多为卵圆形、圆柱形，但有时某些酵母菌可形成假菌丝。酵母菌无性繁殖以出芽方式生殖。微生物的菌落形态菌落：单个菌体在固体平面培养基上生长繁殖形成的肉眼可见的群体。区分和识别各类微生物可从菌落形态（群体形态）和细胞形态（个体形态）两方面进行，菌落形态是无数细胞形态的集中反映，因此每一大类微生物都有其一定的菌落特征，可通过这些特征差异区分和识别。特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、光泽、质地等。*