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T淋巴细胞的分离、计数中山医学院免疫学教研室01掌握外周血淋巴细胞分离的方法02掌握细胞计数的方法实验目的和要求外周血中细胞种类细胞密度红细胞和多核白细胞1.090血小板密度梯度离心法：利用一种密度介于之间而近于等渗的溶液做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种细胞加以分离。本实验：淋巴细胞12实验原理实验方案抽取外周血分离淋巴细胞细胞计数01肝素抗凝血02Hank’s液03淋巴细胞分离液04水平离心机05显微镜06细胞计数板实验材料实验步骤肝素抗凝静脉血1.5ml加1.5mlHank’s液稀释04淋巴细胞分离液05置于2ml淋巴细胞分离液上01稀释后的抗凝血03(交界液面：一定不要打乱)02用Hank’s液洗、离心(1000rpm，5min)重复2次血浆分层液红细胞粒细胞离心（2000rpm，25min）淋巴细胞与单核细胞层取10ul于细胞计数板上细胞计数取10ul细胞悬液与90ul白细胞计数液或台盼兰计数液混合用Hank’s液重悬细胞细胞计数板细胞计数数上不数下，数左不数右。实验结果22个大方格内细胞总数单个核细胞浓度（细胞数/ml)×104×10=(稀释倍数）活细胞百分率=活细胞数细胞总数×100%细胞活力检测：（死细胞被染成蓝色，活细胞不着色）细胞数量：
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