细胞遗传学技术.ppt

能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应、又不能单独激

发人或动物体产生抗体的抗原。它只有反应原性，不具免疫

原性，又称不完全抗原。能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应、又不能单独激

发人或动物体产生抗体的抗原。它只有反应原性，不具免疫

原性，又称不完全抗原。能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应、又不能单独激

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发人或动物体产生抗体的抗原。它只有反应原性，不具免疫

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原性，又称不完全抗原。细胞遗传学技术一、培养基1、外周血淋巴细胞染色体制备培养基配制新生小牛血清20%RPMI1640基本培养基80%植物血球凝集素（PHA)按说明配置01胎牛血清20%021640、HamF10培养基原液80%2、绒毛、羊水细胞培养基配置人外周血淋巴细胞染色体制备方法静脉血0.3/5ml培养基37℃培养72小时收细胞前2-3小时加秋水仙素制片，染色12二、细胞培养方法特点取材方便、方法稳定、易掌握和推广意义检查该个体体细胞核型羊水细胞染色体制备羊水细胞主要来自胎儿皮肤、胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道的粘膜上皮。方法：培养15天左右特点：孕期为16-20周取材，B超监测取材，专人操作。培养15天左右方法复杂、设备较昂贵、成功率较低。安全性：流产率约1%左右意义：检测胎儿核型3、绒毛细胞染色体制备绒毛为受精卵经有丝分裂衍生出来的胎儿附属结构1）方法：直接法培养法：短期和长期培养2）特点：（1）孕8-10周取材，B超检测，严格无菌，专人操作。（2）培养15天左右或直接制片（3）直接法较为简单，可避免母体污染，但染色体形态较差，分裂期细胞少。3）安全性：流产率约2-4%4）意义：检测胎儿核型，进行早期诊断。4、骨髓细胞染色体制备技术直接法或培养法意义：（1）血液病的染色体异常检测（2）骨髓细胞染色体畸变作为遗传物质受损检测指标较为灵敏。1Q显带特点：三、染色体显带技术9、16号染色体着丝粒区和Y染色体长臂部分区域荧光明显优点：带纹清晰缺点:试剂仪器价高,带纹易退色荧光染料染色21G显带2特点：胰酶处理、Giemsa染色、带纹与Q带相似3优点：制作方便、费用低廉、标本易保存4缺点：带纹不及Q显带清晰013、C显带着丝粒区深染确定着丝粒数目和位置1、9、16着丝粒区深染而大Y染色体长臂部分深染0202四、荧光原位杂交技术fluorescencein-situhybridization,FISH1、基本原理指利用已进行荧光标记的探针与细胞、组织切片上的核酸进行杂交，检测特异序列的DNA或RNA。它是在细胞遗传学、分子遗传学和免疫学相结合的基础上发展起来的一项技术。01探针标记的方法直接法进行标记间接法进行标记操作操作简便,探针标记后稳定,一次标记后可使用二年.方法敏感,能迅速得到结果.在同一标本上,可同时检测几种不同探针.不仅可用于分裂期细胞染色体数量或结构变化的研究,而且还可用于间期细胞的染色体数量及基因改变的研究.3、FISH技术的特点重复序列的探针（卫星(satellite)探针）β卫星DNA位于端着丝粒染色体及各号染色体的异染色体质周围临床应用：α卫星DNA探针主要检测人染色体的着丝粒经典卫星DNA(classic-saielliteDNA)位于染色体1、9、15、16和Y染色体长臂异染色质周围羊水细胞可不培养直接筛查21三体Down氏综合片）18三体（Edward综合征），13体（Patau综合征），45、XO(Torner氏综合征)和47XXY（Klinfelter综合征）。4、FISH在细胞遗传学中的应用单一序列探针