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小鼠β淀粉样蛋白Aβ酶联免疫分析.pdfVIP

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小鼠β淀粉样蛋白Aβ酶联免疫分析--第1页

小鼠β淀粉样蛋白(Aβ)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

96T

检测范围:

60μg/L-2000μg/L

使用目的:

本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中β淀粉样蛋白(Aβ)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠β淀粉样蛋白(Aβ)水平。用纯化的小鼠

β淀粉样蛋白(Aβ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β淀

粉样蛋白(Aβ),再与HRP标记的β淀粉样蛋白(Aβ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标

抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并

在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的β淀粉样蛋白(Aβ)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠β淀粉样蛋

白(Aβ)浓度。

试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(3200μg/L)0.5ml×1瓶

3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶

4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份

5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张

6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

1600μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

800μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

400μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

200μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

100μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、

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待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,

然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽

量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.

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