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所有稀释度的平板菌落数均300,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数计算。试样例次稀释度选定计数稀释度菌量/(个/g或mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-35.2x10425262053210-3,10-42.6x1053271601210-22.7x10442841523710-2,10-39.0x10452612510-22.6x1036无法计数56831210-43.1x10601若所有稀释度平板菌落数均30,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数计算。若所有稀释度平板均无菌落生长,则应按1乘以最低稀释倍数计算。02试样例次稀释度选定计数稀释度菌量/(个/g或mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-35.2x10425262053210-3,10-42.6x1053271601210-22.7x10442841523710-2,10-39.0x10452612510-22.6x1036无法计数56831210-43.1x106若所有稀释度均不在30~300之间,有的300,有的又30,则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数计算。菌落数在1~100时,按四舍五入报告两位有效数字。菌落数≥100时,第三位数字按四舍五入计算,取前面两位有效数字,为了缩短数字后面的零数,也可以10的指数表示。(四)落计数报告方法A若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。B若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。C称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。注意事项无菌操作操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装,应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。采样的代表性如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨,液体样品须经过振摇,以获得均匀稀释液。
菌落总数的测定
(GB4789.2—2010)01并掌握食品中菌落总数测定方法和原理。022?、了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中的意义。一、的二、原理细菌数量的表示方法由于所采用的计数方法不同而有两种:菌落总数和细菌总数。是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后,所得1g或1mL检样中形成的细菌菌落总数。以CFU/g(mL)来表示。一定条件包括培养基成分、培养温度和时间、pH、是否需要氧气等。1、菌落总数按国家标准方法规定,即在需氧情况下,36±1℃培养48±2h,能在平板计数琼脂上生长发育的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,也不能区分其中细菌的种类,只包括一群在计数平板琼脂中生长发育、嗜中温的需氧和兼性厌氧的细菌菌落总数,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。01菌落总数测定的卫生学意义02菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。食品中细菌菌落总数越多,则食品含有致病菌的可能性越大,食品质量越差;菌落总数越小,则食品含有致病菌的可能性越小。须配合大肠菌群和致病菌的检验,才能对食品做出较全面的评价。细菌总数指一定数量或面积的食品样品.经过适当的处理后,在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。细菌总数也称细菌直接显微镜数。通常以1g或1mL样品中的细菌总数来表示。三?、?材料品检样养基
平板计数培养基,无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液它
无菌培养皿,无菌吸管,电炉、恒温培养箱等。记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量平皿内倾注15~20mL琼脂培养基,混匀做几个适当倍数的稀释液计算菌落总数→报告36±1℃培养48±2小时或(24±2)小时检样选择2~3个适宜稀释度各1mL,分别加入灭菌平皿内四、五、??步骤(一)?????取样、稀释和培养
1、?以无菌操作取检样25g(mL),放于225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振荡或研磨制成1:1
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