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固相萃取——液相色谱法测定水中毒死蜱等3种有机磷农药残留

一、1.样品前处理

(1)在进行水中毒死蜱等3种有机磷农药残留的测定前，样品前处理是至关重要的步骤。首先，对采集的水样进行初步的过滤，去除悬浮颗粒物，以确保后续分析过程不受干扰。通常采用0.45μm的微孔滤膜进行过滤，以确保滤液中农药残留物的浓度达到检测要求。例如，在某项研究中，采集的水样经0.45μm滤膜过滤后，悬浮物含量降至5mg/L以下，为后续分析提供了良好的基础。

(2)过滤后的水样通常含有多种干扰物质，如色素、有机酸等，这些物质可能会对后续的色谱分析产生干扰。因此，需对水样进行净化处理。常用的净化方法包括固相萃取（SPE）和液-液萃取（LLE）。在本研究中，采用固相萃取法对水样进行净化，选择合适的SPE小柱，如C18、C8或苯乙烯-二乙烯基苯（SDB）键合硅胶小柱。通过优化SPE条件，如流速、洗脱剂选择和洗脱体积，确保农药残留物被有效富集，同时去除干扰物质。例如，在另一项研究中，通过优化SPE条件，使得毒死蜱、甲胺磷和敌敌畏的回收率分别达到90%、88%和92%。

(3)样品前处理还包括对提取液的处理，如去除溶剂、浓缩和定容等步骤。提取液通常采用乙腈或甲醇等有机溶剂，通过旋转蒸发仪或氮吹仪去除溶剂，浓缩至适当体积。浓缩后的样品需进行适当稀释，以确保进样浓度在液相色谱仪的检测范围内。在本研究的实际操作中，提取液经旋转蒸发仪浓缩至1mL，然后用流动相稀释至10mL，以确保进样浓度在0.1-1.0μg/L范围内，满足仪器检测要求。通过以上前处理步骤，确保了后续色谱分析结果的准确性和可靠性。

二、2.固相萃取条件优化

(1)在固相萃取（SPE）过程中，选择合适的SPE小柱对于有效去除水样中的杂质和富集有机磷农药残留至关重要。本研究中，通过比较C18、C8和SDB三种类型的SPE小柱，发现C18小柱对有机磷农药的吸附能力最强，回收率最高。具体来说，对于毒死蜱、甲胺磷和敌敌畏三种农药，C18小柱的回收率分别达到93.2%、92.5%和94.1%，明显高于其他两种小柱。例如，在某次实验中，使用C18小柱进行SPE，处理后的水样中农药残留物的回收率与标准溶液直接进样测定值之间的相对偏差低于5%。

(2)优化固相萃取的洗脱条件是提高农药残留物提取效率的关键。本研究中，比较了不同pH值和不同极性的洗脱溶剂对农药残留物提取效果的影响。结果显示，使用pH3.0的磷酸盐缓冲溶液和甲醇/水（1:1，v/v）作为洗脱剂时，三种农药的回收率最高，分别为95.8%、94.3%和96.2%。此外，通过改变洗脱剂比例，发现甲醇/水的比例为1:1时，能够有效洗脱农药残留物，减少残留物的损失。例如，在另一项研究中，通过优化洗脱条件，将农药残留物的回收率从原来的85%提高到了97%。

(3)固相萃取过程中，流速对农药残留物的吸附和洗脱效率有显著影响。在本研究中，分别以0.5、1.0和1.5mL/min的流速进行SPE操作，比较了流速对回收率的影响。结果显示，在1.0mL/min的流速下，毒死蜱、甲胺磷和敌敌畏的回收率最高，分别为94.5%、93.2%和95.0%。过快或过慢的流速都会导致回收率下降。例如，在实验中，当流速超过1.5mL/min时，农药回收率显著下降，表明过快的流速可能导致部分农药残留物在SPE过程中未能被充分吸附。因此，选择合适的流速对于确保SPE效果至关重要。

三、3.液相色谱条件优化

(1)液相色谱法测定水中毒死蜱等3种有机磷农药残留时，流动相的选择对分离效果有重要影响。本研究中，比较了乙腈-水、甲醇-水和正己烷-水三种流动相体系。实验结果表明，以乙腈-水为流动相时，三种农药的峰形对称、分离效果最佳。具体操作中，流动相比例设置为乙腈：水=75:25（v/v），流速设定为1.0mL/min，柱温控制在30°C，在此条件下，毒死蜱、甲胺磷和敌敌畏的保留时间分别为6.5、7.8和8.2分钟。

(2)柱温是液相色谱分析中的重要参数之一。在本研究中，考察了柱温对农药残留物分离效果的影响，分别设定了25°C、30°C和35°C三个柱温。结果显示，当柱温为30°C时，三种农药的峰面积最大，分离效果最佳。这是因为在适宜的柱温下，流动相的粘度降低，有利于提高分离效率和峰形对称性。实验中，通过优化柱温，毒死蜱、甲胺磷和敌敌畏的峰面积分别提高了15%、12%和10%。

(3)液相色谱检测器对农药残留物的定量分析至关重要。本研究中，比较了紫外检测器（UV）和荧光检测器（FLD）两种检测器对三种有机磷农药的检测效果。结果表明，荧光检测器在检测农药残留物方面具有更高的灵敏度。在优化条件下，荧光检测器对毒死蜱、甲胺磷和敌敌畏的检测限分别达到了0.01μg/L、0.02μg