色谱分析法王慧.ppt

第四节基本术语——结论ABCDhtRAtR’tM空气峰/溶剂峰了解!试样在色谱柱中分离过程包括：各组分在两相间的分配情况——塔板理论各组分在色谱柱中的运动情况——速率理论12第五节色谱分离基本理论第五节色谱分离基本理论1，塔板理论假想：色谱柱为一个精馏塔，塔内有一系列连续、相等体积塔板，每一塔板理论高度为H。假设：在每一块塔板上，被分离组分在气液两相间瞬时达到一次分配平衡，然后随载气从一块塔板向下一块塔板以脉动式迁移。第五节色谱分离基本理论多次分配平衡后，K小的组分先离开精馏塔，K大的组分后离开精馏塔，不同K值组分分离。第五节色谱分离基本理论理论塔板数n：可以认为是组分在柱中的平衡次数/分配次数。用以描述色谱柱分离效能。取决于固定相和流动相自身性质。一般情况下，n1000。n越大，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，所得色谱峰越窄。涡流扩散项A分子扩散项B传质扩散项C1H=A+B/u+C·u2H-理论塔板高度；u-载气的线速度(cm/s)32，速率理论——动力学理论第五节色谱分离基本理论第五节色谱分离基本理论涡流扩散项A组分随载气迁徙时，受填充物颗粒阻碍（大小及填充不均匀）而改变流动方向，形成紊乱的类似“涡流”的流动，同一组分运行路线长短不同，流出时间不同，使色谱峰展宽。第五节色谱分离基本理论使用细颗粒的固定相并填充均匀可减小A，提高柱效。分子扩散项B第五节色谱分离基本理论纵向分子扩散是由于浓度梯度引起的。当样品被注入色谱柱时，它呈塞子状分布。随着流动相的推进，塞子因浓度梯度而向前后自发地扩散，使组分分子在色谱柱轴向上产生浓差扩散，其方向是沿柱纵向扩散，色谱峰变宽。物质系统由于浓度不均匀而发生物质迁移过程，称为传质。影响这个过程进行速度的阻力，叫传质阻力。因传质阻力的存在，使分配不能瞬间达到平衡，使分子具有滞留倾向，在此过程中，部分组分分子随流动相向前运动，发生分子超前，引起色谱峰展宽。传质阻力项C第五节色谱分离基本理论色谱峰保留时间——定性分析色谱峰高或峰面积——定量分析参考书：P159第六节色谱法定性定量分析第六节色谱法定性定量分析1，试样的预处理将待测组分与基质分离，用溶剂提取等方法除去干扰杂质。第六节色谱法定性定量分析实际样品：无色、无味；多为有机物；含量很低。分析对象：组成复杂；形态多样；基质含量高，干扰严重。样品：主要依据是每个组分的保留值；一般需要标准样品，利用纯组分样品对照的方式定性；对某一未知试样，单独用色谱法定性十分困难，因此常需与化学分析及其它仪器分析方法相结合。2，色谱定性分析——确定每个色谱峰所代表的化合物第六节色谱法定性定量分析利用绝对保留值定性01在一定的固定相和恒定的操作条件下，每种物质都有一定的保留值，一般不受其它组分影响。故可利用已知物的保留值和未知物的保留值对照进行定性。02方法：待测组分色谱峰与纯物质色谱峰比较。03条件：此法针对已知或简单组分样品；并要求严格控制色谱操作条件，保证重现性。04，利用色谱保留值定性第六节色谱法定性定量分析利用相对保留值定性（文献保留值）01利用r2,1作定性分析，它仅与柱温和固定相性质有关，可消除某些操作条件差异所带来的影响。方法：采用基准物质与待测样品混合进样，测得r2,1，对比色谱手册中与之对应的标准物质及已知纯物质在相同条件下的r2,1值。条件：组分较简单的已知范围的混合物试样02第六节色谱法定性定量分析第六节色谱法定性定量分析练习方法：首先用被测试样作色谱图，然后将已知纯物质加到试样中，在相同条件下作色谱图，对比。条件：试样组分较复杂，峰间距离太近，难以准确测定其保留值时，采用此法定性。将标准物质加入试样中，比较前后色谱图，找峰高明显增加的色谱峰。，峰高增量定性：第六节色谱法定性定量分析采用极性差别较大的两种不同色谱柱进行分离，观察保留时间是否均相同。方法：将试样和标准物的混合物分别在两根极性相差较大的色谱柱上进行色谱分离，观察两色谱峰是否始终重合。目的：避免不同组分由于保留值的偶然一致性，可能发生的定性错误，双色谱系统定性：第六节色谱法定性定量分析第六节色谱法定性定量分析3，色谱定量分析1定量依据和校正因子在一定的操作条件下，被测组分质量与其色谱峰面积（或峰高）成正比。即mi=fiAi比例常数：组分i的定量校正因子组分i色谱峰面积绝对校正因子fi