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1.4发酵工程及其应用
事实:1.大肠杆菌是原核生物,细胞拟核内有一个环状的双链DNA分子。细胞分裂前,DNA分子会进行复制。分裂时一般是以简单的二分裂方式进行无性繁殖的。2.在适宜条件下,大肠杆菌分裂一次仅需要20~30min。3.实际上,大肠杆菌在生长和繁殖过程中,会消耗大量的营养物质,环境pH也会发生改变。积极思维:大肠杆菌的繁殖有多快?
思考:1.计算:人的肠道环境非常适合大肠杆菌的生长和繁殖。利用计算器计算一个大肠杆菌在人的肠道中24h后,理论上能达到的数量。2.推理:大肠杆菌是一类细菌。基于日常生活中多种细菌影响我们生活的实例(如肉汤腐败),推理细菌除了繁殖快之外,可能还会具有的特征。微生物还有哪些特定功能呢?这些特定功能又是如何被发酵工程所利用的呢?4722×1021积极思维:大肠杆菌的繁殖有多快?
一、发酵工程利用了微生物的特定功能阅读教材35页,归纳微生物的特定功能和特点,并举例说明这些特定功能和特点在发酵工程中的用处。
微生物具有生长旺盛、繁殖快的特定功能。在发酵工程液体培养中,接种后细菌细胞数量会呈几何级数增长。微生物吸收多、转化快的特定功能为发酵工程产生大量代谢产物提供了保障。微生物具有适应性强、易变异的特定功能。这为通过育种大幅度地提高菌种的生产性能提供了保障。微生物还具有种类多、分布广的特点。微生物种类繁多不仅体现在物种的种类上,还体现在微生物的生理代谢类型上。可根据需要在发酵工程中将这些特定功能加以利用。
二、发酵工程的一般过程采用现代工程技术手段,利用微生物或动植物细胞的特定功能,在人工控制的环境下生产满足人类需求的特定产品等的工程技术。发酵工程不再是一种仅仅利用微生物代谢活动进行生产的简单工艺,而是一个综合了微生物学、化学工程、基因工程、细胞工程、机械工程和计算机软硬件工程的多学科综合工程。1.发酵工程的概念
2.发酵工程的基本环节接种菌种选育配制培养基扩大培养灭菌发酵罐内发酵分离、提纯产物获得产品原料预处理发酵工程一般包括发酵原料的预处理、发酵培养基的配制、菌种选育和扩大培养、发酵生产和产物的分离与提纯等主要步骤。
(1)发酵原料的预处理对原料进行粉碎、蒸煮,水解成葡萄糖等供微生物利用。(2)发酵培养基的配制添加水、无机盐等营养物质,调节碳氮比和pH等。(3)灭菌发酵工程所用的菌种大多是选育的高产的单一菌种。一旦有杂菌污染,可能导致产量大大下降。培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。对通入的空气进行灭菌,对生产环境需进行消毒处理。
(4)菌种选育和扩大培养选育优良的菌种是发酵工程的首要条件。菌种选育环节在很大程度上决定了生物发酵产物的成败。自然选育诱变育种基因工程育种在菌种的筛选过程中,一般都要研究其最适发酵条件。这样,发酵工程可根据目标菌种的新陈代谢特性,选择不同的方式进行发酵,确定大规模发酵生产过程中的控制条件。筛选产酸量高的黑曲霉用来生产柠檬酸;使用基因工程改造的啤酒酵母,加速发酵、缩短生产周期;
(4)菌种选育和扩大培养将菌种扩大培养才能满足大规模生产的需要。在大规模的发酵生产中,需要将选育出的优良菌种经过多次扩大培养,让它们达到一定数量再进行接种,这样可以缩短菌种在发酵罐中发酵的时间。种子罐扩大培养
(5)发酵生产①发酵罐工业上用来进行微生物发酵的装置,通过控制发酵罐中的相关条件,为微生物提供一个最有利于产物合成及积累的培养环境。
要对设备和培养基严格灭菌;发酵过程中需要随时取样,检测培养液中的细菌数目、产物浓度等,以了解发酵进程;要及时添加必需的培养基组分,以满足菌种的营养需求;要严格控制温度、pH、溶氧等环境因素。②发酵条件
(6)产物的分离和提纯发酵产品包括微生物的代谢产物或菌体。通过过滤发酵液,离心去除固体杂质,采用蒸馏法等进一步纯化目标产品。
现在,发酵工程已经发展到可以利用计算机对发酵过程进行自动调节控制的阶段。氧含量的调节:通过通气量和搅拌的速度来实现。温度的调节:通过发酵罐夹层或蛇形管中的冷却水的热交换作用来实现。pH的调节:通过在培养基中添加酸或碱等来实现。
根据发酵过程的操作方式不同,可将工业发酵分为分批发酵和连续发酵等。(1)分批发酵:一次投料、一次接种、一次收获的间歇发酵方式。3.发酵工程的种类
1.分析:尝试推测单细胞微生物生长曲线形成的原因。2.设计:尝试设计一个利用青霉生产青霉素的分批发酵生产流程(用简图表示)。学生活动
延滞期:细菌等微生物在刚接种到
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