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专题3

植物组织培养技术

高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质

已分化的植物细胞，仍具有全能性

实例

受精卵生殖细胞体细胞

全能性的比较:

植物细胞动物细胞

可分裂的细胞不可分裂的细胞

外植体：

原理:

必要条件：

相关概念:

细胞的全能性

植物组织培养

一定的营养物质、激素和其他外界条件（如温度、光照时间、PH)

细胞离体

脱分化：

再分化：

愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞

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植物材料的选择

不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基

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2、影响植物组织培养的因素

讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？

答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持培养基的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。

微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。

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2

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植物激素的影响

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pH、温度、光照

3、植物组织培养过程:

离体组织或细胞

植物体

脱分化

细胞分裂素≈生长素

愈伤组织

芽

根

细胞分裂素生长素

细胞分裂素生长素

再分化

植物细胞培养

不需要光

需要光

培育无病毒植株

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培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）

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基因工程中亦需用到植物组织培养的方法

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诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题

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4、植物组织培养的应用：

人工种子

组织培养与常规繁殖相比优点众多

同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要具有以下优点：

（1）快速。

采用常规的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。

（2）周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行，因条件可控，所以不受季节限制，可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进行繁殖。

（3）经济效益高。花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小，在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株1元计算，每年产值上百万元。

（4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。

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流程：

制备MS固体培养基

外植体的消毒

接种

栽培

培养

移栽

思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？

答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。

培养

愈伤组织的培养

从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养

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继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为1－1.5cm时，就可以进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养

愈伤组织的继代培养

在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色

当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的见光培养

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珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培

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3、试管苗的培养

本课题内容小结

菊花组织培养

基础知识

实验操作

植物体的组织培养

影响组织培养的因素

细胞分化

细胞全能性

组织培养过程

营养

激素

环境条件

MS固体培养基制备

外植体消毒

接种

培养

移栽

栽培

21.下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：

①

②

③

练习1、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：

（1）①表示__________________，它能被培养成为④的根本原因是______________________________________。

（2）②表示____________，它与①相比分化程度_____