蔬菜中杀螟硫磷的快速测定 免疫层析法.docxVIP

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蔬菜中杀螟硫磷的快速测定免疫层析法

1范围

本标准规定了蔬菜中杀螟硫磷农药残留的免疫层析快速检测方法的原理、试剂与材料、试样制备、测定、结果判定与表述与检测限和特异性。

本标准适用于农产品中杀螟硫磷农药残留的在线筛查和快速监测。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而构成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误表的内容）或修改版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

GB2763-2019食品安全国家标准食品中农药最大残留限量

3原理

利用免疫测定中竞争法检测原理，通过在检测区包被一定量的包被抗原，对照区包被羊抗鼠多克隆抗体，利用胶体金标记的抗体与样品及检测区的物质之间的竞争反应，观测在检测条的检测区和对照区呈现的反应结果（试纸条出现色带），然后根据色带颜色的深浅，判断农药检出或超标。

4试剂与材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯和GB/T6682中规定的二级水。

免疫层析试剂盒：杀螟硫磷免疫层析试剂盒，试剂盒中包括阳性参考品、阴性参考品、甲醇、样品处理液、检测液和检测试纸条，检测试纸条使用铝箔袋密封包装。

5试样制备

称取10g±0.01g蔬菜样品，剪碎后加入1mL甲醇，静置15min。加入5mL样品处理液，充分混匀后，利用滤纸进行固液分离。滤液转移至10mL容量瓶并定容至10mL（样品处理液冲洗滤纸中的样品）。样品滤液由检测液进行5倍稀释

6测定

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撕开铝箔袋，取出检测试纸条。

将试纸条浸入检测液中，在层析作用下向检测试纸条的尾端侧向流动，在6-8min（最长不超过8min）之内观察检测区和质控区的色带条数和颜色深浅。同时对试剂盒内的阳性参考品、阴性参考品和检测液（空白）进行同样操作，以协助结果判断。

7结果判定与表述

对照阳性参考品、阴性参考品和空白的结果，根据竞争免疫法的原理及试纸条检测区和控制区的色带，按照如下原则进行结果判定：

（a）无效：在检测试纸条的质控区未出现色带，表示试纸条已失效；

（b）阳性：仅在质控区出现一条红线，表示待测样品中杀螟硫磷含量已超标；

（c）阴性：在检测区及控制区各出现一条红线，表示待测样品中杀螟硫磷含量未超标；

（d）临界值：在控制区出现一条红线，在检测区出现一条模糊的阴影线，表示待测样品中杀螟硫磷含量接近标准值。

凡是结果呈现阳性或临界值的样品均为“阳性可疑”样品，需重复检测两次以上，并可用质谱方法进行确证。

8检测限和特异性

8.1检测限

蔬菜中杀螟硫磷的检测限为0.5mg/kg（依据为GB2763-2019食品安全国家标准食品中农药最

大残留限量）。

8.2特异性

试纸条对甲基毒死蜱、甲基对硫磷、倍硫磷、甲基立枯磷、三唑磷等农药的交叉反应均小于1%。