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七叶皂苷钠对大鼠肝纤维化的治疗作用及机制研究姜瑜1李嘉菲1孙雯1周辉2隋宏书3*
七叶皂苷钠对大鼠肝纤维化的治疗作用及机制研究姜瑜1李嘉菲1孙雯1周辉2--第1页
发布时间:2023-06-09T07:23:37.383Z来源:《医师在线》2023年5期作者:姜瑜1李嘉菲1孙雯1周辉2隋宏书3*
[导读]目的研究七叶皂苷钠对大鼠肝纤维化的治疗及机制方法SD雌性大鼠随机分为对照组、肝纤维化组、七叶皂苷钠治疗组,每次打药
前记录大鼠情况,6周结束实验后取大鼠肝右叶。
1.山东第一医科大学临床与基础医学院济南250000
2.山东第一医科大学公共卫生与健康管理学院济南250000
3.山东第一医科大学临床与基础医学院组织学与胚胎学系济南250000
摘要:目的研究七叶皂苷钠对大鼠肝纤维化的治疗及机制方法SD雌性大鼠随机分为对照组、肝纤维化组、七叶皂苷钠治疗组,每次
打药前记录大鼠情况,6周结束实验后取大鼠肝右叶。各组大鼠外观及活动情况初步体现患病情况,HE染色观察肝组织形态结构和纤维化
程度,肝纤维化评分评价各组大鼠纤维化程度,ELISA试剂盒检测肝组织匀浆内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)来评价肝脏氧
化应激水平。结论七叶皂苷钠可以改善由四氯化碳诱导引起的肝纤维化,其机制可能与抗氧化作用相关。
关键词:肝纤维化;七叶皂苷钠;氧化应激
1前言
肝纤维化(HF)是一种由各种因素损伤肝脏引起的慢性肝损伤,如酒精肝、脂肪肝、病毒性肝炎等0,若未及时治疗,可能发展为肝硬
化、肝癌0。肝星状细胞(HSCs)是引起HF的关键因素,合成大量胶原蛋白,引起细胞外基质沉积,最终导致肝纤维化0。
研究表明,氧化应激(OS)和肝纤维化存在联系,氧化应激反映了一种体内清除失衡,是活性氧(ROS)和抗氧化系统的失衡0。ROS
包括O2-、OH-等,具有高反应活性,通常人体内大多数ROS会被超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化酶消除0。研究发现,ROS可以HSC的活
化,促进细胞增殖,最终导致ECM沉积引起肝纤维化0。
七叶皂苷钠(SA),具有减少渗出、抗水肿、消炎等作用0,对原发性肝癌有治疗作用0,本实验从OS入手,探究七叶皂苷钠对大鼠肝纤
维化的治疗作用及作用机制。
2材料与方法
2.1材料
2.1.1实验动物
SD雌性大鼠,6周龄,清洁级,购于济南朋悦动物繁育公司。
2.1.2试剂
七叶皂苷钠,玉米油,四氯化碳
2.2方法
2.2.1动物模型的建立和给药方案32只SD雌性大鼠随机分为3组:A.正常空白对照组8只;B.CCL4诱导肝纤维化模型组12只;C.七叶
皂苷钠治疗组12只。B和C组大鼠均以0.6μl/g浓度腹腔注射CCL4+玉米油混合溶液(12%CCL4),一周3次,共6周,A组注射相同剂量的玉
米油,同样注射6周。第3周开始,C组每天腹腔注射3.6mL·kg-1七叶皂苷钠溶液一次,共4周,A、B组腹腔注射相同剂量生理盐水。
2.2.2标本采集至6周后,大鼠腹腔注射相应剂量5%的水合氯醛,取大鼠肝右叶,保存于10%的中性甲醛。
2.2.3大鼠外观及活动情况检测每次打药前观察大鼠外观、称重及活动死亡情况,并记录。
2.2.4HE染色石蜡切片依次放入二甲苯以及下降浓度梯度酒精中脱蜡,苏木精染色10s,蒸馏水冲洗10min,伊红染色20s,蒸馏水冲洗
5min,二甲苯透明,切片放入升高浓度梯度酒精中,中性树胶封片。
2.2.5肝纤维化评分检测随机选取10张切片,光学显微镜下观察肝脏组织学变化,肝纤维化按标准分为以下5种,S0、S1、S2、S3、
S4、S5,肝纤维化程度从无至重度最后发展为肝硬化。
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2.2.6肝脏氧化应激测定配置肝组织匀浆,离心取上清液,相应试剂盒检测SOD、MDA含量。
3结果
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3.1大鼠外观及活动情况检测
表1各组大鼠外观及活动情况检测
三组大鼠给药后呈现明显不同的外观和行为活动,与对照组相比,肝纤维化组症状较重,七叶皂苷钠组有所缓解(见表1)。
3.2光镜下各组大鼠肝组织病理变化
图1所示,对照组肝细胞排列有序,肝小叶正常;
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