《中药提取物生产技术》课件——制备薄层色谱法.PPT

制备薄层色谱技术中药提取物生产技术

制备薄层色谱技术的概念01目录content制备薄层色谱技术的原理及色谱条件02制备薄层色谱技术的操作03

01制备薄层色谱法的概念

一、制备薄层色谱法的概念薄层色谱技术又称薄层层析法，是将色谱固定相涂布于玻璃、铅铂、塑料片等载板上形成均一薄层，将被分离的物质在薄层用适当的流动相展开，使性质不同的化合物得以分离。

02制备薄层色谱技术的原理与色谱条件

二、制备薄层色谱技术的原理与色谱条件（一）原理该技术属于液相色谱的范畴，选择一定的固定相材料或适当处理就可进行吸附、分配、离子交换或排阻等色谱分离。一般情况下，样品量1mg~1g固定相是硅胶、氧化铝及C18反相键合相硅胶

二、制备薄层色谱技术的原理与色谱条件（二）比移值（Rf值）以被分离化合物斑点中心离点样原点的距离与溶剂前沿离原点的距离的比值。?a：被分离化合物斑点中心到原点的距离b：溶剂前沿到原点的距离

二、制备薄层色谱技术的原理与色谱条件（二）比移值（Rf值）以被分离化合物斑点中心离点样原点的距离与溶剂前沿离原点的距离的比值。△Rf＞0.05，两物质可分离。被分离物质的Rf理想值在0.05~0.85

二、制备薄层色谱技术的原理与色谱条件（三）影响因素固定相、流动相是内在根本性因素

二、制备薄层色谱技术的原理与色谱条件（三）影响因素在吸附色谱中，充分考虑样品、洗脱剂和吸附剂三者关系。分离非极性物质时，选择非极性展开剂和高活性吸附剂分离强极性物质时，选择强极性展开剂和活性较低的吸附剂分离中等极性物质时，选择中等极性展开剂和中等活性吸附剂

二、制备薄层色谱技术的原理与色谱条件（四）色谱条件的选择01.固定相的选择被分离物质极性吸附剂的吸附性能溶剂极性大弱（稍小）大小强小硅胶G常用的极性吸附剂，可加入荧光剂氧化铝碱性、中性、酸性聚酰胺分离水溶性、脂溶性物质

二、制备薄层色谱技术的原理与色谱条件（四）色谱条件的选择02.流动相的选择相似相溶强极性样品宜用强极性展开剂，弱极性样品宜用弱极性展开剂对于硅胶TCL，洗脱剂的极性强度顺序全氟烷（最弱）＜己烷＜戊烷＜四氟化碳＜苯/甲苯＜三氯甲烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜乙腈＜丙醇/正丁醇＜水＜甲醇＜三乙胺＜乙酸＜甲酸（最强）

二、制备薄层色谱技术的原理与色谱条件（四）色谱条件的选择02.流动相的选择相似相溶

03制备薄层色谱技术的操作

三、制备薄层色谱技术的操作（一）薄层板的制备要求：均一性、厚度制备方法主要分为干法、湿法，常用湿法。

三、制备薄层色谱技术的操作（一）薄层板的制备01.湿法铺板一份吸附剂+两份水刮刀平铺法或涂铺器涂铺法均匀涂布活化调成糊状烘烤

三、制备薄层色谱技术的操作（二）上样薄层板的容量与其厚度的平方根呈正比，但若厚度过厚，易造成拖尾。一般采用条形上样。上样工具可用注射器、小滴管或上样器。可重复上样，但后一次上样要在前一次样品条的溶剂挥发之后再进行。

三、制备薄层色谱技术的操作（三）展开可分为上行展开、下行展开、单次展开和多次展开。多采用上行法展开。

三、制备薄层色谱技术的操作（四）显色常采用碘蒸气显色法、紫外线显色法01.碘蒸气显色碘蒸气与有机物分子形成有色缔合物，为物理吸附。02.紫外线显色化合物减弱吸附剂中荧光物质的紫外吸收强度，引起荧光的熄灭所致显色。

三、制备薄层色谱技术的操作（四）显色常采用碘蒸气显色法、紫外线显色法03.显色剂显色显色剂：硫酸、0.05%高锰酸钾溶液、5%磷钼酸乙醇溶液溶液。

三、制备薄层色谱技术的操作（五）收集确定所需谱带位置后，用刮刀或与真空相连的管型刮离器将所需要成分的谱带连同吸附剂一起刮下，收集，用溶剂将所要组分洗脱下来，并清洗工具，合并洗脱液。常用洗脱剂丙酮、乙醇、氯仿等，1g吸附剂用5mL溶剂洗脱。

04制备薄层色谱技术的特点及进展

四、制备薄层色谱技术的特点及进展（一）特点01.分离快速，展开时间短02.方法简便，仪器简单03.灵敏度高04.固定相、流动相选择范围宽05.固定相一次使用，不会被污染06.对被分离物质的性质没有限制07.自动化

四、制备薄层色谱技术的特点及进展（二）进展01.加压薄层色谱由溶剂泵和展开仓组成流动相被溶液泵以一定流速输入展开仓。

四、制备薄层色谱技术的特点及进展（二）进展02.离心制备薄层色谱离心分离法渗透于色谱领域而产生的高效分离法。

小结概念01.原理及色谱条件02.原理、比移值、影响因素、色谱条件的选择制备薄层色谱技术的操作03.薄层板的制备、上样、展开、显色、收集

思考01.薄层板如何制作？02.如何选择薄层色谱技术的展开剂？

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