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CD63在戊型肝炎病毒感染中的作用机制

张黎;温智恒;田亚宾;黄维金;王佑春

【摘要】Thepresentpaperaimedtofindouttheinteractingproteinof

hepatitisEvirus(HEV)capsidproteinORF2andexploreitsroleinHEV

infection.CD63wasidentifiedasapotentialHEVORF2-interactingprotein

byscreeningahumanlivercDNAlibraryforyeasttwo-hybridmethod.Co-

immunoprecipitationandpull-downassayswereusedtoverifythe

interaction.TheexpressionofcellsurfaceCD63wasdetectedbyflow

cytometryinHEVsusceptible,non-susceptibleandoverexpressedcells

(PLC/PRF/5)respectively.HEVinfectivitywasmeasuredthroughvirus

infectionassay.TheresultsindicatedthatexpressionlevelofCD63onthe

cellmembraneofHEVsusceptiblecelllineswaslowerthanthatofHEV

non-susceptiblecelllines.OverexpressionofCD63inhibitedtheHEV

infectionofPLC/PRF/5cells,whilesiRNAinterferenceofCD63promoted

theHEVinfection.TheresultsindicatedthatCD63couldinteractwithHEV

ORF2,andmayinhibitHEVinfectioninhepatocytes.%本研究旨在寻找戊型

肝炎病毒(hepatitisEvirus,HEV)衣壳蛋白ORF2的相互作用蛋白,探讨其在HEV

感染中的作用.采用酵母双杂交方法从人肝细胞文库中筛选与HEVORF2相互作用

的蛋白,结果显示CD63与HEVORF2相互作用.Pull-down实验提示原核表达的

ORF2与CD63结合较弱,而免疫共沉淀实验提示真核表达的ORF2能与CD63结

合.流式细胞术检测结果显示,HEV易感细胞PLC/PRF/5细胞膜表面的CD63表达

水平普遍低于HEV非易感细胞.过表达CD63抑制PLC/PRF/5细胞的HEV感染,

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而小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)干扰CD63表达则促进HEV感染.

结果提示,CD63能与HEVORF2相互作用,可能抑制HEV感染肝细胞.

【期刊名称】《微生物与感染》

【年(卷),期】2017(012)006

【总页数】7页(P348-354)

【关键词】戊型肝炎病毒;ORF2;CD63

【作者】张黎;温智恒;田亚宾;黄维金;王佑春

【作者单位】中国食品药品检定研究院,北京102629;中国食品药品检定研究院,北