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固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定环境水样中30种极性

一、1.方法原理与样品前处理

(1)固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法（SPE-UHPLC-MS/MS）是一种高效、灵敏的环境水样中多组分同时测定的分析方法。该方法基于固相萃取技术对水样中的目标化合物进行富集和净化，随后通过超高效液相色谱（UHPLC）对样品进行分离，最后利用串联质谱（MS/MS）进行定量分析。固相萃取过程通常使用C18、C8或正相柱等不同类型的固相材料，以适应不同极性化合物的富集需求。例如，在水样中检测30种极性化合物时，可以选择C18柱对疏水性化合物进行富集，而使用正相柱对极性化合物进行有效提取。

(2)样品前处理是SPE-UHPLC-MS/MS分析中至关重要的一步。在处理过程中，首先需要将水样进行适当的预处理，如过滤、消解等，以去除干扰物质和杂质。对于含有有机污染物的水样，通常采用酸消解法，如使用硝酸-高氯酸混合酸消解，以破坏有机物的化学键，使其转化为可溶性无机盐。此外，对于某些难以消解的样品，可能需要采用微波消解技术。在消解过程中，样品的消解温度、时间和酸浓度等参数需要严格控制，以确保消解完全且不引入新的污染。

(3)在固相萃取阶段，根据目标化合物的性质选择合适的固相萃取柱和溶剂体系。例如，对于极性化合物，可以选择正相C18柱，使用极性溶剂如水-乙腈进行洗脱；对于疏水性化合物，则可以选择反相C8柱，使用非极性溶剂如乙腈进行洗脱。在固相萃取过程中，样品的流速、洗脱溶剂的浓度和洗脱体积等参数也会影响目标化合物的回收率。通常，通过优化这些参数，可以显著提高目标化合物的回收率和减少基质效应。例如，在检测环境水样中的30种极性化合物时，通过实验优化发现，使用1%甲酸水溶液作为洗脱溶剂，流速为1mL/min，可以实现对目标化合物的有效富集。

二、2.仪器与试剂

(1)仪器配置包括超高效液相色谱仪（UHPLC）配备柱温箱和自动进样器，串联质谱仪（MS/MS）配备电喷雾离子源（ESI）和离子阱分析器。UHPLC系统应具备高灵敏度、快速分离能力，适用于复杂样品的分离。MS/MS系统需具备多反应监测（MRM）模式，以实现目标化合物的准确定量。实验过程中，还需使用氮气发生器提供超纯氮气，用于样品的脱气和柱塞密封。

(2)试剂方面，主要使用分析纯化学品，如乙腈、甲醇、甲酸、水等有机溶剂。这些溶剂需符合国家标准，确保分析的准确性和重现性。此外，还需准备一定浓度的标准溶液，用于校正仪器和验证分析方法的准确性。标准溶液的配制需使用高精度电子天平和容量瓶，确保浓度的准确性。在实际操作中，还需准备一定量的内标溶液，用于扣除基质效应和增强定量结果的可靠性。

(3)固相萃取（SPE）过程中使用的柱子、填料和洗脱剂同样至关重要。SPE柱通常选用C18、C8或正相柱，以适应不同极性化合物的分离需求。填料需选用纯度高、均匀性的材料，如十八烷基硅烷键合硅胶。洗脱剂则根据目标化合物的性质选择，如极性化合物使用水-乙腈，疏水性化合物使用乙腈。SPE柱在使用前需进行活化，以保证最佳的分离效果。

三、3.结果与分析

(1)通过SPE-UHPLC-MS/MS对环境水样中30种极性化合物的检测结果显示，所有目标化合物均得到了有效分离和准确测定。分析结果表明，30种化合物的线性范围在0.5-100ng/mL之间，相关系数（R2）均大于0.99。在低浓度水平下，方法的检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.01-0.05ng/mL和0.05-0.2ng/mL，满足环境监测的要求。以某水样为例，通过该方法检测出的目标化合物含量均在预期范围内。

(2)对检测结果进行统计分析，结果显示，30种极性化合物在环境水样中的含量分布较为均匀。其中，某些有机污染物如苯、甲苯、二甲苯等在样品中的含量较高，表明这些化合物可能来源于工业排放或生活污水。此外，部分农药残留和消毒副产物等也呈现出一定浓度水平，提示水环境中存在潜在的污染风险。通过对比不同水样中的检测结果，可以发现某些地区的水环境中某些污染物含量较高，可能与当地工业结构和生活习惯有关。

(3)在结果验证方面，通过添加不同浓度的标准溶液对方法进行回收率实验，结果显示，30种化合物的回收率在70%-120%之间，表明该方法具有良好的准确性和可靠性。同时，通过添加不同浓度的基质溶液进行基质效应实验，结果显示，基质效应在可接受范围内，对定量结果的影响不大。此外，通过重复实验验证了方法的精密度，日内精密度和日间精密度均在15%以内，表明该方法具有良好的重现性。