脱碘酶DIO2_DIO3在光周期介导花鲈生殖调控中的作用.pdf

摘要

花鲈（Lateolabraxmaculatus）是我国重要的水产养殖经济鱼类，属于短日照繁殖鱼

类，由于其繁育正值秋冬季，低温导致的一系列问题已成为花鲈苗种规模化生产的主要

制约因素。因此，通过生态环境调控实现花鲈的延迟或提前产卵是当前花鲈人工繁育亟

需解决的重要科学问题。鱼类的季节性繁殖涉及光信号的感知、转换以及神经内分泌等

saccusvasculosusSV

复杂的生理过程。最近几年发现，鱼类的血管囊（，）具有光接收

和神经内分泌输出的双重功能，可以作为鱼类的光感受器。本研究利用已构建的花鲈转

录组数据筛选出花鲈II型脱碘酶（DIO2）和III型脱碘酶（DIO3）的EST序列，通过

ORF验证和3’RACE技术扩增得到LmDIO2和LmDIO3基因的cDNA序列，并分析了

LmDIO2LmDIO3

其序列结构特征，随后进行了和在组织发布、性腺发育各时期以及在

体和离体两种实验方式下，不同光周期处理的表达检测。此外，本研究还针对花鲈原代

细胞开展了TSHβsiRNA干扰实验，在血管囊的原代细胞中，研究LmTSHβ对下游基因

DIO2和DIO3的调控作用。具体研究结果如下：

1LmDIO2cDNA1872bpORF774bp257

（）序列长度为，长度，编码个氨基酸，

蛋白分子量为28.85kDa，等电点为6.44，有一个T4结构域。序列比对与进化树显示，

LmDIO2SparusaurataChelmonrostratusDIO2

与金头鲷（）和钻嘴鱼（）的氨基酸序列

相似度最高，与新西兰背唇隆头鱼（Notolabruscelidotus）的亲缘关系最近。LmDIO3有

LmDIO3aLmDIO3bLmDIO3acDNA1497bpORF786bp

和两个亚型：序列长，长度，

编码261个氨基酸，蛋白分子量为29.72kDa，等电点为6.66；LmDIO3bcDNA序列长

1598bp，ORF长度804bp，编码267个氨基酸，蛋白分子量为30.32kDa，等电点为9.23。

LmDIO3aLmDIO3b64.42%SECIS

和的氨基酸序列相似性为，二者都具有一个元件

（SElenoCysteineInsertionSequence）和一个T4结构域，且都具备跨膜功能。LmDIO3a

氨基酸序列与钻嘴鱼（Chelmonrostratus）、条纹鲈鱼（Moronesaxatilis）和黄鳍棘鲷

Acanthopagruslatus93.87%LmDIO3b

（）的相似度同为，而与黄鳍棘鲷的相似度最高，

是90.26%，且在进化树上，二者均与黄鳍棘鲷的亲缘关系最近。LmDIO2和LmDIO3

在鱼类中进化较为保守。

2LmDIO2LmDIO3LmDIO2

（）组织分布结果表明，和均在脑部广泛分布，其中