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荧光光谱的原理与应用

重要内容2荧光光谱的基本原理1荧光光谱仪的原理、操作及数据处理2荧光光谱的应用3参照资料4

荧光光谱的基本原理3

4荧光定义荧光是辐射跃迁的一种，是物质从激发态失活到多重性相似的低能状态时所释放的辐射。

5构造原理：电子在原子或分子中排布所遵照的规则。基态和激发态能量最低原理泡利不相容原理洪特规则基态：当一种分子中的所有电子的排布都遵从构造原理时，此分子被称为处在基态。激发态：当一种分子中的电子排布不完全遵从构造原理时，此分子被称为处在激发态。

6电子激发态的多重度：M=2S+1S为电子自旋量子数的代数和(0或1)；电子激发态的多重度根据洪特规则(平行自旋比成对自旋稳定)，三重态能级比对应单重态能级低；大多数有机分子的基态处在单重态；

7分子能级比原子能级复杂；在每个电子能级上，都存在振动、转动能级；分子能级与跃迁激发：基态(S0)→激发态(S1、S2激发态振动能级)：吸取特定频率的辐射；量子化；跃迁一次到位；失活：激发态→基态：多种途径和方式(见能级图)；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势；第一、第二、…电子激发单重态S1、S2…；第一、第二、…电子激发三重态T1、T2…；

8雅布隆斯基分子能级图S2S1S0T1吸收发射荧光发射磷光系间窜越内转换振动弛豫能量l2l1l3外转换l?2T2内转换振动弛豫

9跃迁规则跃迁前后原子核的构型没有发生变化、跃迁过程中电子自旋没有变化、跃迁前后电子的轨道在空间有较大的重叠和轨道的对映性发生了变化的跃迁是容许的；跃迁过程中电子自旋发生了变化、跃迁前后电子的轨道在空间不重叠或轨道的对映性未发生变化的跃迁是禁阻的。Franck-Condon原理：在电子跃迁完毕的瞬间，分子中原子核的构型是来不及变化的。

10电子处在激发态是不稳定状态，轻易返回基态，在这个过程中通过辐射跃迁(发光)和无辐射跃迁等方式失去能量，这个过程就称为失活。失活途径辐射跃迁荧光磷光内转换外转换系间窜越振动弛豫无辐射跃迁激发态停留时间短、返回速度快的途径，发生的几率大。失活的途径

11振动弛豫：同一电子能级内以热能量互换形式由高振动能级至低相邻振动能级间的跃迁。发生振动弛豫的时间一般为10-12s。无辐射跃迁失活的途径通过内转换和振动弛豫，高激发单重态的电子跃回第一激发单重态的最低振动能级。内转换：多重度相似的电子能级中等能级间的无辐射能级跃迁。

12无辐射跃迁失活的途径系间窜越：不一样多重态,有重叠的转动能级间的非辐射跃迁。变化电子自旋，禁阻跃迁，通过自旋—轨道耦合进行。外转换：激发分子与溶剂或其他分子之间产生互相作用而转移能量的非辐射跃迁；外转换使荧光或磷光减弱或“猝灭”。

13荧光发射：电子由第一激发单重态的最低振动能级→基态（多为S1→S0跃迁），发射波长为?’2的荧光；10-7～10-9s。辐射跃迁失活的途径磷光发射：电子由第一激发三重态的最低振动能级→基态（多为T1→S0跃迁）；发射波长为?3的磷光；10-4～100s。电子由S0进入T1的也许过程：（S0→T1禁阻跃迁）S0→激发→振动弛豫→内转换→系间窜越→振动弛豫→T1发光速度很慢，光照停止后，可持续一段时间。由图可见，发射荧光的能量比分子吸取的能量小，波长长；?’2?2?1；

14激发谱固定发射波长(一般将其固定于发射波段中感爱好的峰位)，扫描出的化合物的发射光强(荧光/磷光)与入射光波长的关系曲线。重要光谱参量发射谱固定激发波长(一般将其固定于激发波段中感爱好的峰位),扫描出的化合物的发射光强(荧光/磷光)与入射光波长的关系曲线。吸取谱化合物的吸取光强与入射光波长的关系曲线。

15重要光谱参量吸取谱反应出的是物质的基态能级与激发态能级之间所有的容许跃迁。一般状态下的物质的表观颜色大部分时候取决于其吸取特性。激发谱则反应的是基态与所有与该荧光发射有关的能级之间的跃迁。其所展现的关系比吸取谱要有选择性，但有时候又不如吸取谱来的直接。电子跃迁到不一样激发态能级时，吸取不一样波长的能量(如能级图?2,?1)，产生不一样吸取带，但均回到第一激发单重态的最低振动能级再跃迁回到基态，产生波长一定的荧光(如?’2)。因此，发射谱的形状