原创力文档- 1、本文档共23页，其中可免费阅读7页，需付费200金币后方可阅读剩余内容。
- 2、本文档内容版权归属内容提供方，所产生的收益全部归内容提供方所有。如果您对本文有版权争议，可选择认领，认领后既往收益都归您。
- 3、本文档由用户上传，本站不保证质量和数量令人满意，可能有诸多瑕疵，付费之前，请仔细先通过免费阅读内容等途径辨别内容交易风险。如存在严重挂羊头卖狗肉之情形，可联系本站下载客服投诉处理。
- 4、文档侵权举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
拟南芥钙依赖蛋白激酶单磷酸化位点突变双分子荧光互补载体的构建
摘要：将含有pGADT7-CPK4重组载体的E.coliDH5α菌液进行质粒提取,作为后续实验的基因模板。首先，要得到点突变的目的片段，主要是利用设计好的突变引物，通过三轮PCR反应获取。接着，将突变片段CPK4(N3)进行电泳和胶回收，对目的片段和双分子荧光互补实验空载体pSPYCE分别进行双酶切。之后，再用T4连接酶连接、转化，并将其涂布于含有卡那抗性的LB培养基中,过夜培养之后挑选阳性单克隆。最后，进行菌落PCR、酶切鉴定和测序。测
序结果表明：成功构建了拟南芥钙依赖蛋白激酶单磷酸化位点突变双分子荧光互补载体pSPYC
文档评论（0）