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同位素标记法探究实验专题高三二轮复习
什么是同位素在同一元素中,质子数相同、中子数不同的原子为同位素例如:16O与18O12C与14C同位素的物理性质可能有差异,但组成的化合物化学性质相同
同位素标记法1.定义用物理性质特殊的同位素来标记化学反应中原子的去向,就是同位素标记法2.作用用于示踪物质的运行和变化规律。通过追踪同位素标记的化合物,可以弄清楚化学反应的详细过程。
生物学研究中常用的同位素放射性同位素原子核不稳定,会自发地放射出粒子或射线14C32P3H35S需要自显影技术闪烁计数器进行射线测量分析记录仪器进行追踪稳定同位素不会发生衰变15N18O2用测量分子质量或离心技术来区别同位素需要质谱仪,气相层析仪,核磁共振等测定
1.探究分泌蛋白的合成和运输途径材料:豚鼠的胰腺腺泡细胞方法:将3H标记亮基酸注入材料中观察并追踪较强放射性在细胞中的位置,分析判断得出结果
结论分泌蛋白在核糖体和内质网合成,再运输到高尔基体,再由囊泡运输到细胞膜内侧,最后到细胞膜外侧。
2.探究CO2如何转变成糖类材料:小球藻方法:用14CO2供小球藻进行光合作用观察并每30秒收集小球藻一次,追踪放射性的去向,填入表格,分析判断得出结果
结果14CO2中的14C转移到三碳化合物,然后再转移到糖类中14CO2—C3—(CH2O)
卡尔文循环是光合作用中碳反应的一部分,分三个阶段1.CO2的固定一分子CO2通过Rubisco的酶作用整合到一个五碳糖1,5-二磷酸核酮糖(RuBP)的第二位碳原子上,形成一个六碳化合物。但这种六碳化合物极不稳定,会立刻分解为两分子的三碳化合物3-磷酸甘油酸。意义:把原本并不活泼的CO2分子活化,使之随后能被还原。
卡尔文循环2.C3的还原1.3-磷酸甘油酸被光反应中生成的NADPH还原,此过程需要消耗ATP,产物是3-磷酸丙糖。后来经过一系列复杂的生化反应,一个碳原子将会被用于合成葡萄糖而离开循环。
卡尔文循环3.C5的再生剩下的五个碳原子经一系列变化,最后再生成一个1,5-二磷酸核酮糖,循环重新开始。循环运行六次,生成一分子的葡萄糖。即六分子二氧化碳经过卡尔文循环会合成一个葡萄糖,循环过程中C5和C3的含量相对稳定。
3.探究DNA和蛋白质谁是遗传物质材料:T2噬菌体方法:32P标记噬菌体DNA,35S标记噬菌体蛋白质(甲硫氨酸)培养:用32P的脱氧核苷酸培养基培养大肠杆菌,使大肠杆菌具有放射性,再用具有放射性大肠杆菌培养噬菌体,离心,上清液中得到32P标记DNA的噬菌体
3.探究DNA和蛋白质谁是遗传物质培养:用35S的氨基酸培养基培养大肠杆菌,使大肠杆菌具有放射性,再用具有放射性大肠杆菌培养噬菌体,离心,上清液得到35S标记蛋白质的噬菌体
3.探究DNA和蛋白质谁是遗传物质培养:用普通的大肠杆菌分别培养标记的噬菌体,培养时间要适宜。分离:搅拌离心观察:离心管内上清液和沉淀物的放射性物质高低比较:两次实验结果
实验结果上清液(含噬菌体)沉淀物(含大肠杆菌)35S放射性很高放射性很低32P放射性很低放射性很高
分析噬菌体侵染大肠杆菌过程吸附注入合成组装释放
结论噬菌体侵染细菌时,DNA进入细菌的细胞中,而蛋白质外壳仍留在细胞外。子代噬菌体的各种性状,是通过亲代的DNA遗传的。DNA才是噬菌体的遗传物质
4探究DNA是否为半保留复制材料:大肠杆菌原理:15N和14N是两种稳定同位素,这两种同位素的相对原子质量不同,利用离心技术可以在试管中分离开含有不同氮元素的DNA。
4探究DNA是否为半保留复制方法:先用含有15NH4CL的培养液培养大肠杆菌,让大肠杆菌繁殖若干代,然后,将大肠杆菌转移到含有14NH4CL的普通培养液中。在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA,再将提取的DNA进行离心,记录离心后试管中DNA的位置。
结果亲代DNA在试管底部第一代DNA在试管中部第二代DNA在试管中部和上部
演绎推理得出结论结论:DNA是半保留复制
5探究光合作用中氧气的来源方法:用16O的同位素18O分别标记H2O和CO2,使它们分别变成H218O和C18O2实验:第一组给植物提供H2O和C18O2第二组给同种植物提供H218O和CO2
检测手段:18O没有放射性,可以通过测量反应氧中的同位素比值来检测18O的存在。结果:在其他条件都相同的情况下,第一组释放的氧气都是O2第二组释放的都是18O2
实验结论光合作用中氧气的来源全部来源于水,不是来源于二氧化碳
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