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山东医学高等专科学校;免疫性溶血实验室检查;免疫性溶血实验室检查;(一)抗人球蛋白试验(Coombstest)
人体内产生的不完全抗体,是一种分子量很小的球蛋白(IgG),可作为抗原,经免疫动物产生抗体,此抗体即为抗人球蛋白抗体。以此抗体检测红细胞表面和血清中有无不完全抗体的试验,称抗人球蛋白试验(Coombs试验)。检测红细胞表面有无不完全抗体的试验为直接抗人球蛋白试验(DAGT),检测血清中有无不完全抗体的试验为间接抗人球蛋白试验(IAGT),以前者最常用。
;1.直接抗人球蛋白试验(DATG)
【实验原理】
自身免疫性溶血性贫血的自身抗体(IgG),是不完全抗体,结合在红细胞表面,使其致敏。直接抗人球蛋白试验,是应用抗人球蛋白试剂(抗IgG和/或抗C3d)与红细胞表面的IgG分子结合,并出现凝集反应。红细胞表面如果不存在自身抗体,则凝集反应呈阴性。
;;1.直接抗人球蛋白试验(DATG)
【参考区间】
(1)正常人直接抗人球蛋白试验(DAGT)为阴性。
(2)阳性对照管及测定管出现凝集,结果为阳性。表示被检红细胞表面吸附有不完全抗体。;1.直接抗人球蛋白试验(DATG)
【临床意义】
新生儿溶血病(患儿的红细胞在胎儿时已被母体的不完全抗体致敏);
自身免疫性溶血性贫血(患者的红细胞被自身不完全抗体致敏),如恶性淋巴瘤、白血病、某些感染性疾病等导致的免疫性溶血性贫血;
某些药物诱发性免疫性溶血性贫血(如甲基多巴、青霉素等);
结缔组织病等亦可呈阳性反应。当抗体与抗原结合有剩余时,直接与间接试验均为阳性。
;2.间接抗人球蛋白试验(IAGT)
【实验原理】
间接试验是检查血清中游离的不完全抗体的试验。本试验是应用已知红细胞与抗人球蛋白血清,检测被检者血清中是否含有相应的不完全抗体,如果存在,则已知红细胞被致敏,再加入抗人球蛋白血清,可出现凝集。;2.间接抗人球蛋白试验(IAGT)
【参考区间】
(1)正常人间接抗人球蛋白试验(IAGT)为阴性。
(2)如果阳性对照管与测定管出现凝集为阳性,说明被检血清中存在有不完全抗体;2.间??抗人球蛋白试验(IAGT)
【临床意义】
间接抗人球蛋白试验常用于检测Rh和ABO血型不合妊娠的母亲血清中的不完全抗体。;(二)冷凝集素试验(CAggT)
【实验原理】
冷凝集素为IgM类完全抗体,在低温时可使自身红细胞、O型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集,凝集反应的高峰在0℃~4℃,当温度回升到37℃时凝集消失。
【参考区间】
正常人血清中抗红细胞抗原的lgM冷凝集素效价≤1︰32(4℃)。;(二)冷凝集素试验(CAggT)
【临床意义】
CAggT阳性见于冷凝集素综合征(1:1000)。支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、肝硬化、淋巴瘤及多发性骨髓瘤者亦可增高,但不超过l︰1000。;(三)冷热溶血试验(D-LT)
冷热溶血素试验(D-LT)是诊断阵发性冷性血红蛋白尿(PCH)的主要指标,此种罕见的自身免疫性溶血,起因于冷反应抗体IgG(简称D-L抗体)介导的红细胞破坏,这种非凝集的自身IgG能有效地激活补体发生血管内溶血。此抗体是一种双相温度的冷溶血素,有时亦称为“双相”抗体。;(三)冷热溶血试验(D-LT)
【实验原理】
冷热溶血试验是模拟患者发病的体外试验。将患者的血液置于0~4℃冰箱中,使D—L型冷反应性抗体与红细胞牢固结合,并同时结合补体,但无溶血,当温度升至37℃使补体激活,并发生溶血,以此与PNH鉴别。;(三)冷热溶血试验(D-LT)
【参考区间】
1.正常人各管均无溶血为阴性。
2.如果第1管和第3管发生溶血,而其余各管无溶血发生为阳性。
;(三)冷热溶血试验(D-LT)
【临床意义】
1.阳性反应主要见于阵发性冷性血红蛋白尿症。
2.直接Coombs试验阳性(C3型),在此病发作时亦可呈阳性,
发作后间歇期很快转阴性(应注意标本的送检时间)。
3.PCH更多的是产生于一些病毒感染的并发症。
;谢
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