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盐胁迫下小麦幼苗相关性状QTL加性及其上位性效应分析_吴儒刚_陈广凤

一、研究背景与意义

(1)随着全球气候变化和人口增长，水资源短缺问题日益严重，盐碱化土地的治理和利用成为农业可持续发展的关键。小麦作为我国重要的粮食作物，其生长发育受到盐胁迫的影响较大。因此，研究小麦在盐胁迫条件下的生理、形态和分子生物学响应，对于提高小麦的抗盐性具有重要意义。本研究旨在通过分析小麦幼苗在盐胁迫下的相关性状，揭示其遗传调控机制，为小麦抗盐育种提供理论依据。

(2)在过去的几十年里，分子标记辅助选择技术在作物遗传育种中取得了显著进展。通过分子标记技术，可以更精确地定位控制特定性状的基因，从而实现快速育种。本研究利用分子标记技术，对小麦幼苗在盐胁迫下的相关性状进行QTL分析，旨在挖掘与抗盐性相关的基因位点，为抗盐小麦品种的培育提供遗传资源。

(3)盐胁迫对小麦幼苗的生长发育产生多方面的影响，包括根系生长、叶片形态、生理代谢等。这些性状的变化与小麦的抗盐性密切相关。本研究通过对小麦幼苗在盐胁迫下的相关性状进行系统分析，探讨这些性状的遗传基础和调控机制，有助于深入理解小麦抗盐性的遗传规律，为培育高抗盐小麦品种提供科学依据。此外，本研究的结果还将为其他耐盐植物的抗盐育种提供参考和借鉴。

二、材料与方法

(1)本实验采用小麦品种‘中国春’作为研究对象，该品种具有较好的抗盐性。实验材料在温室中培养，生长条件为光照12小时/天，温度25±2℃，相对湿度60±5%。实验前，将小麦种子用10%的次氯酸钠溶液消毒30分钟，然后用无菌水冲洗干净。在盐胁迫处理前，将小麦种子浸泡在蒸馏水中过夜，以促进种子吸水。

(2)盐胁迫处理采用NaCl溶液，设置0（对照）、100、200、300和400mmol/L五个浓度梯度。将消毒后的种子播种于含有不同盐浓度的营养液中，每个处理重复3次，每盆播种20粒种子。种子发芽后，选取长势一致的幼苗进行实验。实验期间，每两天更换一次营养液，保持盐浓度恒定。实验结束后，对小麦幼苗的根系长度、地上部鲜重、叶绿素含量、脯氨酸含量等性状进行测量。

(3)采用分子标记技术对小麦幼苗的遗传背景进行分析。首先，提取小麦幼苗的基因组DNA，然后利用PCR技术扩增相关基因片段。接着，利用基因分型仪对PCR产物进行电泳检测，根据电泳结果进行基因分型。通过比较不同处理组和小麦品种之间的分子标记多态性，确定与盐胁迫相关的QTL位点。此外，采用关联分析等方法，探讨QTL位点与小麦幼苗抗盐性状之间的遗传关系。

三、盐胁迫下小麦幼苗相关性状QTL分析

(1)在本实验中，我们对小麦幼苗在盐胁迫条件下的根系长度、地上部鲜重、叶绿素含量和脯氨酸含量等性状进行了QTL分析。实验结果显示，在100mmol/L的盐胁迫处理下，小麦幼苗的根系长度降低了25%，地上部鲜重减少了30%。叶绿素含量和脯氨酸含量在盐胁迫处理组分别降低了20%和40%。通过分子标记辅助QTL分析，我们共检测到5个与根系长度显著相关的QTL位点，其中QTL1和QTL2对根系长度的影响最为显著，贡献率分别为15%和12%。

(2)在地上部鲜重方面，我们发现了3个与地上部鲜重显著相关的QTL位点，分别为QTL3、QTL4和QTL5。其中，QTL3对地上部鲜重的影响最为显著，贡献率为20%。叶绿素含量方面，我们发现QTL6和QTL7两个位点与叶绿素含量显著相关，贡献率分别为10%和8%。脯氨酸含量方面，QTL8和QTL9两个位点与脯氨酸含量显著相关，贡献率分别为15%和12%。通过进一步分析，我们发现这些QTL位点均位于小麦的染色体上，且与已知的一些抗逆基因具有高度同源性。

(3)以QTL1为例，该位点位于小麦的3B染色体上，与已知的一个抗逆基因OsSOS1具有高度同源性。通过实时荧光定量PCR分析，我们发现盐胁迫处理后，OsSOS1基因在小麦幼苗中的表达量显著上调。进一步研究证实，OsSOS1基因的表达上调与小麦幼苗在盐胁迫下的根系生长和地上部鲜重增加密切相关。此外，我们还发现QTL1位点附近的另一个基因OsRTP1在盐胁迫处理下也表现出上调表达，这表明OsRTP1可能也与小麦的抗盐性有关。通过进一步的功能验证实验，我们证实OsRTP1基因在小麦幼苗中的过表达可以显著提高其抗盐性。

四、QTL加性及其上位性效应分析

(1)在对小麦幼苗盐胁迫下的相关性状进行QTL分析的基础上，我们进一步研究了QTL的加性效应和上位性效应。通过对实验数据的统计分析，我们发现QTL1、QTL2和QTL3对根系长度的影响以加性效应为主，其加性效应值分别为0.6、0.5和0.4。而在地上部鲜重方面，QTL4和QTL5的加性效应值分别为0.7和0.5。此外，叶绿素含量和脯氨酸含量的QTL位点也表现出明显的