高效液相色谱法测定欧李果中γ-氨基丁酸的含量.doc

HPLC法测定欧李果实中γ-氨基丁酸的含量

蔡愈杭，王小曼，戴文君

上海东锦食品集团有限公司

摘要欧李果实含有丰富的γ-氨基丁酸，采用超声波提取，结合邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法对欧李果实中γ-氨基丁酸的含量进行测定。在对欧李果实提取液柱前衍生后，利用ZORBAXElipseAAAC18色谱柱，以40mmol/L的磷酸氢二钠(pH7.8)及甲醇-乙腈-水(45:45:10,V/V/V)为流动相进行梯度洗脱。以γ-氨基丁酸质量浓度X(μg/mL)对峰面积Y(mAU·min)进行线性回归，得回归方程Y=10.6891X+6.1302，相关系数为0.9996。γ-氨基丁酸平均加标回收率为101.1%，RSD为1.60%。结果证明，该方法具有高效、结果准确、重复性好的特点。通过本法测得欧李果实中γ-氨基丁酸的含量为14.0mg/100g

关键词高效液相色谱法；欧李；γ-氨基丁酸；邻苯二甲醛

HPLCDeterminationofγ-aminobutyricacidContent

inthefruitofCerasushumilis

AbstractThefruitofCerasushumilisisrichinγ-aminobutyricacid(GABA).Combinedwithultrasonicextraction,highperformanceliquidchromatographywitho-phthaldialdelhyde(OPA)pre-colomnderivatizationareusedtomeasureGABAcontentinthefruitofCerasushumilis.Afterpre-colomnderivatzationoftheextractfromCerasushumilis,separationofGABAiscarriedoutonZORBAXElipseAAAC18columnwiththegradientelutionof40mmol/LNa2HPO4(pH7.8)andmethanol-acetonitrile-water(45:45:10,V/V/V).WhileconcentrationsofGABAX(μg/mL)onthepeakareaY(mAU·min)linerregression,theregressionequationwasY=10.6891X+6.1302,withthecorrelationcoefficientof0.9996.Theaveragerecoverywithstandardadditionwas101.1%,whileRSDwas1.60%.Theresultsshowedthatthemethodwasefficient,accurateandreproducible.Bythismethod,thecontentofGABAinthefruitofCerasushumiliswas14.0mg/100g

KeywordsHPLC;Cerasushumilis;GABA;OPA

欧李(Cerasushumilis)，为蔷薇科(Rosaceae)樱桃属(Ceraras)，是生长在我国北方贫瘠沙化环境中的特有野生树种[1]。近年来，欧李作为一种新兴果树，营养价值备受关注。有文献报道[2]，欧李中含有丰富的γ-氨基丁酸。

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid，简称GABA)是一种四碳非蛋白氨基酸，为哺乳动物中枢神经系统重要的抑制性神经递质，具有降血压、安神、增强脑活力、治疗癫痫及调节激素分泌等重要的生理功能[3]。近年来，GABA作为新型的食品功能因子，建立高效准确的检测方法尤为重要。有学者对高效液相色谱法(HPLC)、改良纸层析法及Berthelot比色法进行了比较，结果表明HPLC测定GABA的结果准确、灵敏度高、适用范围广[4]。

本文利用GABA与衍生化试剂邻苯二甲醛(OPA)反应生成具有较强荧光活性衍生化产物的原理，建立柱前衍生高效液相色谱法测定欧李果实中GABA含量，为进一步地开发欧李系列的功能性产品提供有效的分析手段。

1材料与方法

1.1仪器与设备

HP1200型Agilent高效液相色谱仪，FLD检测器；AL104型M