植物细胞工程2(中国药科大学生物工程所有课件).pptVIP

第四节植物原生质体培养技术;;;;;;;;;;一、诱导融合的方法;无机盐诱导融合:NaNO3法;1973年：Keller用pH10.5的50mMCaCl2溶液在37℃时，诱发烟草叶肉原生质体融合。;PEG法特点：;PEG法原理;;最为常用。

具体做法：在无菌条件下混合双亲原生质体----滴加PEG溶液，摇匀，静置---滴加高钙-高pH溶液，摇匀，静置---滴加原生质体培养液洗涤数次---离心获得原生质体细胞团---筛选---再生杂合细胞;电融合法;;;三、杂合体的鉴别与筛选;;;;转基因植物〔Transgeneplant〕是指利用植物遗传工程进行DNA重组，将优良的目的基因稳定的整合到植物的基因组中，并在子代中得到有效的表达，获得具有新的遗传性状的植物体。;〔一〕农杆菌转化法;转移DNA，编码冠瘿碱的合成，能随机整合到植物的染色体上。长度一般为12-24kb，是Ti质粒最重要的局部。;毒性基因〔vir〕;Ti质粒的改造;农杆菌叶盘转化法的操作;农杆菌转化的优点：

1.农杆菌转化方法是一种生物转化系统，因而具有主动性。

2.通过农杆菌转化系统获得转基因植株还具有拷贝数低。转基因较少沉默以及转基因片段较长等优点。

农杆菌转化的缺点：

1.有致瘤的危险

2.不是单子叶植物的寄主。;〔二〕基因直接导入法;;;;;二、植物基因转化的受体系统

;;;3．种质系统以植物的生殖细胞如花粉粒、卵细胞为受体细胞进行基因转化的系统称为种质系统。;三、转入基因的表达和分析;;利用转基因植物生产功能蛋白和工业原料;利用转基因植物生产功能蛋白和工业原料;利用植物生物反响器生产医用蛋白;转基因烟草表达小鼠抗体;利用植物生物反响器生产医用蛋白;利用植物生物反响器生产食品或饲料添加剂;利用植物生物反响器生产工业原料;植物转基因技术在植物品种改进中的应用;控制果实成熟的转基因植物;转基因耐贮藏番茄〔左〕和普通番茄〔右〕;科学家创造出抗肿瘤紫色西红柿;控制果实成熟的转基因植物;抗病虫害的转基因植物;转基因抗虫棉和普通棉对照;我国培育的抗青枯病马铃薯正在大棚中繁殖;细菌毒素蛋白编码基因的植物转基因程序;抗除草剂的转基因植物;抗环境压力的转基因植物;产高品质产物的转基因植物;产高品质产物的转基因植物;09年10??23日，张鹏研究员主持的中科院先进工业生物技术创新基地重要方向工程，利用小分子RNA干扰技术抑制甘薯淀粉合成基因的表达，得到一系列直链淀粉与支链淀粉含量比例发生变化的甘薯新品种，直链淀粉含量可扩展到０－７０％之间，为改变薯类淀粉品质提供了全新的技术手段;产高品质产物的转基因植物;改变花卉形状和颜色的转基因植物;08年11月1日，转基因蓝玫瑰亮相日本东京国际花卉博览会。之前出现在花卉市场上的蓝色玫瑰，实际上是采用染色技术培育而成的白玫瑰，而在日本东京国际花卉博览会上亮相的世界首批转基因玫瑰才是真正的蓝玫瑰，这种玫瑰被植入三色紫罗兰所含的一种能刺激蓝色素产生的基因，花瓣因而自然呈现蓝色。;据日本《产经新闻》09年10月20日报道，日本三得利公司20日宣布，将于11月3日出售世界上首次培育成功的“蓝色玫瑰”。

;改变花卉形状和颜色的转基因植物;