原核细胞的基因表达调控.pptVIP

灭活阻遏蛋白阻遏蛋白诱导物阻遏诱导诱导负调控灭活激活蛋白激活激活蛋白诱导正调控三.调控模式辅阻遏物灭活阻遏蛋白激活阻遏蛋白诱导阻遏阻遏负调控灭活激活蛋白激活激活蛋白阻遏正调控040301大肠杆菌的碳源利用机制诱导物排除法:葡萄糖阻止从培养基中吸收其他可替代碳源的能力。葡萄糖阻遏作用调控碳源利用由CRP激活很多操纵子022.乳糖操纵子的正调控作用①正调控因子:辅助RNA聚合酶与启动子结合而起始转录的蛋白质。葡萄糖活性CRP无活CRPcAMP②CRP结构及其作用a.CRP因子是一同源二聚体,每个亚基为22.5kDa，可被单分子cAMP激活，在应答启动子上，CRP二聚体约结合22bp，其中含有一对保守的五聚体对称序列，是CRP的识别位点，且具有双向性。b.每个CRP亚基均含有一个DNA结合区与一个转录激活区，其中结合区的定位因操纵子而异。AANTGTGANNTNNNTCANATTNNTTNACACTNNANNNAGTNTAANN高度保守五聚体低度保守五聚体转录尤其操纵子的转录调控是转录调控的主要形式。由此根据此原理，基因可以根据其表达产物的机能分为三，同时也有编码组成某代谢途径所有的生物酶群的基因群。其表达是被协调调节。有时不但只是一群代谢酶，而且与其相关并承担相应机能的蛋白的编码基因也被组入协调表达系统内。换言之，在没有调节蛋白因子存在时，操纵子是开放的，一旦有相应的调节蛋白因子出现时，操纵子系统被关闭，这种蛋白因子亦被称为阻遏蛋白。有时存在双重启动子，这时一个启动子位于所有结构基因的上游，而另一个则位于某个结构基因的编码区内，控制其下游部分结构基因的表达。在多重终止子存在的情况下，它们位于整个操纵子的末端，或者分散在一些结构基因的下游，使得结构基因的转录产物分子比根据需要灵活变化。操作子的开始点位于转录起始点的上游5个碱基处，然后直接插入lacZ的转录单位内21个碱基处。阻遏蛋白在野生型细胞内通常大约有十个分子，而lacI基因的转录速度则由RNA聚合酶与自身启动子的亲和性所控制细菌只有在相应的底物出现时，才合成该代谢途径的酶。无诱导物存在的情况下，操纵子不转录，因为此时阻遏蛋白处于活化状态，结合在操纵子上，诱导物的出现使得阻遏蛋白变为无活化状态，并离开操纵子区域，乳糖操纵子是在关闭的状态下为诱导物乳糖诱导所开放的，而不是诱导物阻止阻遏蛋白关闭操纵子。IPTG，异丙基-B-D-硫代半乳糖苷是蛋白质最为经典的序列特异性DNA结合反应模式，操作子拥有细菌调控蛋白的多重识别与结合位点，其横跨转录起始点26bp区域以＋11对称轴，两边各有6bp的典型对称序列，TGTGTG和AATTGT，其中靠近对称轴的两对对称序列与阻遏蛋白的结合中起着主要作用。操作子的这种回文结构与阻遏蛋白的四聚体对称性是相对应的。但突变结果表明＋5到＋17的13bp区域对突变特别敏感，该区域不是对称序列。这意味着操作子上的对称序列仅仅相当于阻遏蛋白的识别接触位点。而真正的结合位点偏向于对称轴左侧的不完全对称区域。生物体内基因表达的调节控制机制，使细胞中基因表达的过程在时间和空间上处于有序状态，并对环境条件的变化做出适当反应的复杂过程，并且也是生物体内细胞分化、形态发生和个体发育的分子基础。第一节基因表达调控概述由于原核生物大都为单细胞生物，缺乏核膜，因此极易受外界环境的影响，需要不断地调控基因的表达，以适应外界环境的营养条件和克服不利因素，提高生物的应变与适应能力以完成生长发育与繁殖的过程。这种调控大多以操纵子为单位进行。一．原核生物基因表达调控的特点第八章原核细胞的基因表达调控是1961年由Jacob和Monod提案并确立，即编码某特定区域的基因与只在DNA分子上发挥作用的区域是各不相同的。基因的表达调控主要发生在转录水平上。二.操纵子调控模型原核生物细胞内功能相关的结构基因组成一排基因簇，由此而形成的转录单位，即为操纵子。(一)概念结构基因（structuralgene）:生物酶与细胞结构所必需1的蛋白质的编码基因，该基因又称为cis作用因子2（cis–acting）。相关结构基因的表达产物协同完成一个3生理生化过程，这些结构基因在一套调控系统作用下4统一开放与关闭，维持合适而精确的基因产物分子比。5结构基因编码各类具有不同结构与功能的蛋白质，包括6结构蛋白、酶和调控蛋白7调控基因（regulatorgene）:基因表达调控蛋白的编码基8因，又称为反式作用因子（trans