《杏鲍菇液体菌种生产技术规程》DB1308T 376—2025.docxVIP

ICS65.020.20

CCSB05

DB1308

承

德

市

地

方标准

DB1308/T376—2025

杏鲍菇液体菌种生产技术规程

2025-01-06发布 2025-01-15实施

承德市市场监督管理局 发布

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前??言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由承德市农业农村局提出并归口。

本文件起草单位：河北平泉食用菌产业技术研究院。

本文件主要起草人：郭旭彦、王秀清、吴昊、刘桂娟、秦振祎、吕正斌、孙娜、刘洁、孙彦平、孙嘉镁、赵云云、刘海峰、苏容彦、袁征。

I

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杏鲍菇液体菌种生产技术规程

范围

本文件规定了杏鲍菇液体菌种生产技术的生产环境、前期准备、生产流程、操作方法、菌种质量检验以及档案记录等内容。

本文件适用于杏鲍菇液体菌种生产。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB5009.3 食品安全国家标准食品中水分的测定

GB5749 生活饮用水卫生标准

NY/T528 食用菌菌种生产技术规程

NY862 杏鲍菇和白灵菇菌种

NY/T1846 食用菌菌种检验规程

NY/T2375 食用菌生产技术规范

术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

生产环境

4.1 厂址选择

符合NY/T528的规定。

4.2 厂房

厂房符合NY/T2375要求。厂房内部设置培养基配置室、灭菌室、冷却室、接种室、摇瓶液体菌种培养室、发酵罐液体菌种培养室等，布局合理。其中培养基配制室、冷却室、摇瓶菌种培养室、发酵罐菌种培养室空间洁净度达到万级以上；接种室空间洁净度达到百级。生产车间地面耐磨、防水、防腐蚀、防滑、易清洗，墙角为圆角，墙壁和天花板防潮、防霉、防水、易清洗。

4.3 生产用水

符合GB5749的规定。

前期准备

1

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5.1 设备

发酵罐、恒温摇床、空气压缩机、空气过滤器、冷干机、干燥吸附机、储气罐、高压蒸汽灭菌锅、蒸汽锅炉、超净工作台、恒温培养箱、显微镜、冰箱，及配套附属设备。

5.2 器具

玻璃三角瓶、试管、培养皿、量杯、玻璃漏斗、接种工具及相关辅助器具。

生产流程

母种活化→接种→培养→发酵罐准备→接种→培养。

操作方法

7.1 母种活化

使用品种和种源符合NY/T528的规定。母种质量符合NY862的规定。接种前取出斜面试管母种，在室温条件下放置1d～2d。

7.2 接种

7.2.1 培养基配制

7.2.1.1 配方

可选择以下配方的一种配置培养基：

——马铃薯（浸出汁）200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、维生素B110mg、水1000mL，

pH自然；

——葡萄糖20g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、维生素B15mg、水1000mL，pH自

然；

——蔗糖11.1g、豆粕粉2.07g、磷酸二氢钾0.67g、硫酸镁0.67g、水1000mL，pH自然。

7.2.1.2 配置

按照7.2.1.1配制培养基，培养基装量为玻璃三角瓶的1/3～1/5，采用通氧砂芯硅胶塞封口。

7.2.2 灭菌

高压蒸汽灭菌，压力0.105Mpa～0.125Mpa，温度121℃～123.5℃，灭菌30min～40min。

7.2.3 接种

将灭菌后的液体培养基放入接种室内超净工作台中，冷却至20℃～25℃进行接种。按照无菌操作要求接种，每瓶接种0.25cm2～0.5cm2琼脂斜面母种块6块～8块。

7.3 培养

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接种后的玻璃三角瓶移至恒温摇床上，在温度20℃～25℃和暗光条件下静置24h后，启动摇床，转速140r/min～160r/min，温度20℃～25℃，定期检查，及时去除污染或异常的菌种。培养6d～7d，检验摇瓶液体菌种质量合格后备用。

7.4 发酵罐准备

7.4.1 发酵罐检查

检查发酵罐是否具有特种设备检验合格证，发酵罐阀门和管路等是否完好，工作正常。

7.4.2 发酵罐空消

发酵罐初次及空置后使用、出现污染和更换品种时进行高压蒸汽灭菌，压力0.105Mpa～0.125Mpa，温度121℃～123.5℃，灭菌时间30min～40min，空罐灭菌。

7.4.3 投料与定容

7.4.3.1培养