【高效备课】高二生物下册人教2019版选择性必修3同步优选：2.2.1 动物细胞培养（教案）.docx

2.2.1动物细胞培养

教案

一、教学目标

1.认同动物细胞培养是模拟体内生理条件在体外进行的培养，由此分析、推出培养动物细胞需要满足的基本条件。

2.尝试建构动物细胞培养的基本流程。

3.认同动物细胞培养是动物细胞工程的基础。

4.简述干细胞的应用，通过探讨干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险，理性看待生物技术的应用，增强社会责任感。

二、教学重难点

1.教学重点

（1）动物细胞培养的条件和过程。

（2）干细胞在生物医学工程中的应用。

2.教学难点

干细胞在生物医学工程中的应用。

三、教学过程

【科技探索之路】动物细胞工程的发展历程

动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。

【本节聚焦】

1.动物细胞培养需要哪些基本条件？

2.动物细胞培养的基本操作过程是什么？

3.怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险？

【导入】从社会中来

在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。那么：

怎样才能获得大量的自体健康皮肤？

能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？

提示：可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增；

目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。

视频展示：人造皮肤：人体再生术的秘密

【一、动物细胞培养的条件】

1.动物细胞培养：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

对象：一般是指动物胚胎或出生不久的幼龄动物组织，因为这些组织细胞比老龄动物的组织细胞生命力旺盛，易于培养，同时增殖能力也更强。

原理：细胞增殖

分散的原因：将组织块分散成单个细胞后，细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出。

2.培养条件：

培养基的构成：合成培养基+血清等天然成分（一般使用液体培养基，也称为培养液）

合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基

血清：含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。

无菌无毒的环境：

①培养液、培养用具：灭菌处理；

②无菌操作；

③适量添加抗生素

温度、PH和渗透压：

①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5℃为宜；

②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为7.2-7.4；

③适宜的渗透压：维持细胞正常的形态和功能。

适宜的气体环境：95%空气+5%CO2的CO2培养箱。

【二、动物细胞培养的过程】

1.体外培养的动物细胞分类：

一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖；

另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，大多数细胞属于这种类型，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁。

2.培养过程：

（1）取动物组织：一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，原因：细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。

（2）制成细胞悬液：用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，去掉组织间蛋白，将组织分散成单个细胞

提问：可以用胃蛋白酶处理吗？

提示：不可以，pH不适宜。

（3）转入培养液进行原代培养（原代培养：动物组织处理后的初次培养），放入CO2培养箱中培养

接触抑制现象：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。

（4）传代培养（分瓶后的细胞培养），放入CO2培养箱中培养。

悬浮生长类：直接用离心法收集

贴壁生长类：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。

相关概念：

①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。

②细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。

③接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。

④传代培养：分瓶后的细胞培养。

强调：

（1）原代培养：动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。

（2）传代培养：将分瓶后的细胞培养称为传代培养。

（3）细胞贴壁：大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁。

（4）接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。

【归纳总结】

【三、干细胞培养及其应用】

1.ES细胞（胚胎干细胞）：

分布：早期胚胎中

特点：具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。

应用实例：在体外分化成心肌细胞、神经元细胞和造血干细胞等

局限性：必须从胚胎中获取，涉及伦理问题；因而限制了在医学上的应用。

2.成体干细胞

分布：成体组织或器官内

举例：造血干细胞（骨髓、外周血和