代谢调控育种袁丽红.ppt

天冬氨酸 E,R 4-磷酸天冬氨酸 E 天冬氨酸半醛 E,R E二氢吡啶二羧酸 同型丝氨酸 同型丝氨酸磷酸 E,R R O-琥珀酰同型丝氨酸 苏氨酸 E,R六氢吡啶二羧酸 胱硫醚 2-酮丁酸 R 二氨基庚二酸 同型半胱氨酸 R赖氨酸 甲硫氨酸 异亮氨酸天冬氨酸族

（谷氨酸棒杆菌）定义：两种末端产物同时存在时，共同的反馈抑制作用大于二者单独作用之和。举例：在嘌呤核苷酸合成中，磷酸核糖焦磷酸酶受AMP和GMP（和IMP）的合作反馈抑制，二者共同存在时，可以完全抑制该酶的活性。而二者单独过量时，分别抑制其活性的70%和10%。合作反馈抑制——cooperativefeedbackinhibition定义：每一分支途径末端产物按一定百分比单独抑制共同途径中前面的酶，所以当几种末端产物共同存在时它们的抑制作用是积累的，各末端产物之间既无协同效应，亦无拮抗作用。积累反馈抑制——cumulativefeedbackinhibition积累反馈抑制——E.coli谷氨酰胺合成酶的调节氨甲酰磷酸13%……AMP41%CTP14%Try16%顺序反馈抑制——sequentialfeedbackinhibition一种终产物的积累,导致前一中间产物的积累，通过后者反馈抑制合成途径关键酶的活性，使合成终止。举例：枯草芽孢杆菌芳香族氨基酸合成的调节酶活性调节机制之一：变构调节变构酶理论：变构酶是一种变构蛋白，具有两个或两个以上的立体专一性不同的接受部位，其中之一与底物结合并具有催化活性，称为活性中心；另一部位可与效应物结合的变构部位，称为调节中心。效应物的结合改变酶的立体构象，并导致酶活性的变化。第五节微生物代谢控制育种1956年谷氨酸发酵成功，标志发酵工业进入代谢控制发酵时期代谢控制发酵时期的核心－－代谢控制发酵技术技术背景代谢控制发酵过程大体上可分为：以生物化学和遗传学为基础，研究代谢产物的合成途径和代谢调控机制选择巧妙的技术路线，通过遗传育种技术获得解除或绕过微生物正常代谢途径的突变株，从而使所需产物有选择性地大量合成和积累代谢控制发酵的关键微生物代谢调控机制能否被解除能否打破微生物正常的代谢调节能否人为控制微生物代谢实现代谢控制发酵的手段代谢调控育种－内因改变－主要技术支柱发酵过程的代谢调控培养－外因改变代谢调控育种特点减少盲目性01定向选育02代谢调控育种应用及成果氨基酸发酵核苷酸发酵一些次生代谢产物正常微生物代谢调节与控制－自我调节微生物有着一套可塑性极强和极精确的代谢调节系统，以保证上千种酶能正确无误、有条不紊地进行极其复杂的新陈代谢反应。调节细胞膜对营养物质的渗透性通过酶的定位控制酶与底物的接触控制代谢物流向－－最主要的调节正常的微生物代谢调控方式控制营养物质透过细胞膜进入细胞如：只有当速效碳源或氮源耗尽时，微生物才合成迟效碳源或氮源的运输系统与分解该物质的酶系统。通过酶的定位控制酶与底物的接触真核微生物酶定位在相应细胞器上；细胞器各自行使某种特异的功能；原核微生物在细胞内划分区域集中某类酶行使

功能：与呼吸产能代谢有关的酶位于膜上；蛋白质合成酶和移位酶位于核糖体上；同核苷酸吸收有关的酶在G-菌的周质区。通过酶的定位控制酶与底物的接触控制代谢物流向(通过酶促反应速度来调节)可逆反应途径由同种酶催化，可由不同辅基或辅酶控制代谢物流向。例如：两种Glu脱氢酶：以NADP为辅基Glu合成以NAD为辅基Glu分解通过调节酶的活性或酶的合成量。关键酶（调节酶）:某一代谢途径中的第一个酶或分支点后的第一个酶。粗调：调节酶的合成（酶合成诱导、酶合成阻遏）细调：调节现有酶分子的活性（催化活力）通过调节产能代谢速率。酶合成的诱导－乳糖操纵子分解代谢物阻遏产物阻遏－色氨酸操纵子酶合成的阻遏lac操纵子的正调控—分解代谢物阻遏CAP－降解物基因活化蛋白分解代谢物激活蛋白，cAMP受体蛋白(CRP)阻遏蛋白操纵基因结构基因调节基因mRNA酶蛋白阻遏蛋白不能与操纵基因结合，所以结构基因表达。酶代谢产物一旦大量积累阻遏蛋白被产物激活，结构