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破壁灵芝孢子粉粗多糖的检验方法
A.1试剂和材料
应符合下列要求：
a)硫酸（分析纯）；
b)D-无水葡萄糖对照品；
c)无水乙醇（分析纯）；
d)硫酸蒽酮溶液：精密称取蒽酮0.1g，加80%硫酸溶液100mL使溶解，摇匀，置于棕色瓶中。
A.2仪器和设备
应符合下列要求：
a)紫外分光光度计；
b)分析天平（精度0.0001g）；
c)离心机；
d)电加热板；
e)玻璃回流装置；
f)电热恒温水浴锅。
A.3标准曲线的制备
A.3.1对照品溶液的制备
取D-无水葡萄糖对照品适量，精密称量，加水制成每1mL含0.1mg的溶液。
A.3.2标准曲线的绘制
精密量取对照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL，分别置于10mL的具塞试管
中，各加水至2.0mL，迅速精密加入硫酸蒽酮溶液5mL，立即摇匀，置沸水浴中加热15min，取出立即
置冰水浴中冷却15min，取出，以相应的试剂为空白，在625nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，
浓度为横坐标，绘制标准曲线。
A.4样品溶液的制备
取本品粉末约2g，精密称量，置250mL圆底烧瓶中，加水100mL，静置1h，加热回流4h，趁热过滤，
用少量热水洗涤滤器和滤渣，将滤纸和滤渣置圆底烧瓶中，加水100mL，加热回流3h，趁热过滤，合并
滤液，置水浴锅上蒸干，残渣用水5mL溶解，边搅拌边缓慢加入乙醇20mL，摇匀，在冰箱4℃放置12h，
（4000r/min）离心10min，弃去上清液，沉淀物用热水溶解并转移至50mL容量瓶中，加水至刻度，摇
匀。
A.5测定
精密量取样品溶液2mL，置10mL具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“迅速、精密加入
硫酸蒽酮溶液5mL”起，同法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中葡萄糖的含量并计算。
A.6结果计算
×V
X=11····················································(A.1)
×V×104
22
式中：
——样品中粗多糖（以葡萄糖计）的含量（g/100g）；
1——测定用样品溶液中葡萄糖的质量（μg）；
1——样品定容体积（mL）；
2——样品重量（g）；
2——测定用样品溶液体积（mL）。
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