检验核医学系列课件标记化合物与放射性药物.ppt

（2）薄层层析纯化：基本原理因固定相的不同而异。例如：硅胶或氧化铝作为固定相的分离原理是根据各个组分吸附力和分配系数的不同；离子交换树脂作为固定相的分离原理是根据各个组分离子荷电性质和数量的不同；聚酰胺作为固定相的分离原理是根据各组分的氢键吸附能力的不同。所以，应该根据待分析的物质的性质，选用相应的固定相和展开剂。

Rf在0-1之间。在同一层系系统和同一展开剂条件下，某物质的Rf值总是保持不变的。第70页,共77页，星期六，2024年，5月（3）凝胶过滤层析常用的葡聚糖凝胶是一种网状多孔的分子筛，小分子物质可以进入凝胶粒子的网孔内部，而分子较大的物质则进不去，只能沿着凝胶粒子间的间隙下行。因此，在洗脱过程中，大分子物质由于行程短而被最先洗脱出来；相反，分子小的物质推进较慢，最后才被洗脱出来，从而达到分离的目的。凝胶过滤法是一种高效、温和的纯化方法，适用于分子量相差较大的物质分离，对于放射性碘标记蛋白和肽类混合物的纯化是比较适用的。第71页,共77页，星期六，2024年，5月3、标记物的鉴定放射性核素标记化合物分离纯化后，要进行放射化学纯度和生物或免疫活性的鉴定。第72页,共77页，星期六，2024年，5月（1）放射化学纯度的测定常用的方法有：放射性纸层析或薄层层析法，放射性高效液相层析法和放射性凝胶电泳法。其中，放射性凝胶电泳法常用于蛋白质和多肽的放射化学纯度鉴定，聚丙烯酰胺凝胶电泳是常见的凝胶电泳方法。凝胶电泳除了一般的电泳分离的电荷效应外，还兼有凝胶的分子筛效应，因此，在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，各种蛋白质的迁移率取决于它们的净电荷多少，以及分子的大小和形状等因素。第73页,共77页，星期六，2024年，5月（2）生物活性的鉴定生物活性和免疫活性的鉴定，需要根据标记化合物的生物性质，以及示踪实验的具体要求而定，可进行特异性结合试验和生物特性测定。例如：受体的生物活性可通过受体与配体的结合率以及受体特性来说明。抗体生物的活性可通过抗原抗体结合率的测定来比较。第74页,共77页，星期六，2024年，5月4、标记物的质量控制性状（1）物理性质检测放射性活度放射性核纯度第75页,共77页，星期六，2024年，5月定义：指特定放射性核素的放射性占总放射性的百分数。测定方法：能谱法屏蔽法半衰期法放射性核纯度第76页,共77页，星期六，2024年，5月pH值（2）化学性质检测化学纯度放射化学纯度第77页,共77页，星期六，2024年，5月2.化学合成法定义：通过各种化学反应，将放射性核素引入到待标记化合物特定位置上的标记方法。是制备标记化合物的主要方法。第38页,共77页，星期六，2024年，5月原则上凡能用化学合成法制备的各种化合物也可用相同的方法制备标记化合物，二者原理相近，但也有差别。不同之处在于：①合成的路线可能不同。②合成所需要的前体常需自行合成。③需要考虑放射性核素标记的位置。④为了提高放射性核素利用率，常在合成的最后一、二步引入放射性核素。第39页,共77页，星期六，2024年，5月特点：化学合成法能制备高比活度的标记化合物，标记位置明确，稳定性佳，产品易于纯化。第40页,共77页，星期六，2024年，5月3.生物合成法利用生物的生理代谢或离体酶的生物活性将简单的放射性物质在活体内或试管中转化成为具有生物活性的放射性核素标记化合物。生物合成法包括全生物合成法和酶促合成法两类。前者是利用生物整体或某一器官的生理活动在活体内进行的合成，后者则利用生物组织中某一种或几种酶在试管中参加生化反应来制备标记化合物。第41页,共77页，星期六，2024年，5月特点：生物合成法可以制备一般的化学合成法难于合成的生物活性物质，例如特定的旋光异构体等。以14C－CO2作为唯一的碳源在密闭的有光照的容器里培养植物（藻类等）合成碳水化合物和蛋白质（可得到有活性的L型氨基酸光