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DB21/T—2019

玉米转基因成分检测操作技术规程

1范围

本标准规定了玉米转基因成分检测过程中抽样、样品接收、样品处理、关键试剂验证、检测、结果

判定与复验、检测后样品的保存及处置、废弃物处理等内容。

本标准适用于PCR方法和试纸条方法检测玉米及其产品转基因成分的操作规程。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T19495.8转基因产品检测蛋白质检测方法

SN/T4835实验室生物废弃物管理要求

农业部1485号公告-4-2010

转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化

农业部2031号公告-19-2013

转基因植物及其产品成分检测抽样

农业部2259号公告-4-2015

转基因植物及其产品成分检测定性PCR方法制定指南

3术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

阳性PCR对照positivePCRcontrol

用含有目的序列的样品DNA进行PCR扩增。

3.2

阴性PCR对照negativePCRcontrol

用不含有目的序列的样品DNA进行PCR扩增。

3.3

PCR空白对照PCRblank,negativereagentcontrol

以水或不含目的DNA试剂进行PCR反应，以验证PCR反应过程中未被污染。

3.4

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检测试纸条dipstickformat

应用双抗体夹心免疫层析的原理，试纸条包装上明确标注了保质期、稳定性试验证明、生产厂家、限量值等内容，适合快速定性分析的侧向流动试纸条。

3.5

抽样sampling

采用适合的工具按照规定的方法，从市场或田间随机采集样品的活动。

3.6

送样Samplesending

送检单位自行抽取和标识，符合转基因检测样品要求，自行送到转基因检测机构委托检测的活动。

3.7

DNA提取试剂盒DNAExtractionKit

通过物理和化学方法使DNA从样品的不同组分中分离出来，利用不同的纯化方法获得纯化DNA，商业化生产的一组试剂或耗材。

4抽样

4.1总体要求

按照农业部2031号公告-19-2013的规定执行。

4.2种子及其加工品

4.2.1种子及其加工品抽样时，按照指定区域随机购买产品即可，每份样品抽取量不少于2Kg。

4.2.2所需物品：抽样工作单、洁净无污染物的样品袋等。

4.2.3抽样工作单根据实际情况，包含以下内容：样品名称、样品编号、商标、型号规格、生产日期

或批号、抽样数量、抽样场所、受检单位情况（受检单位名称、通讯地址、法定代表人、联系人、电话）、生产单位情况（单位名称、通讯地址、联系人、电话）、抽样单位情况（单位名称、联系人、电话、通讯地址）、受检人签字、受检单位负责人签字、受检单位（公章）、抽样人签字、抽样单位（公章）、抽样日期、备注。

4.3叶片

4.3.1每份样品随机抽取20个单株的叶片混合，每片叶片取顶端约5cm长的叶尖。

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4.3.2根据实际需要，所需物品如下：GPS定位仪、采样信息表、自封袋、离心管、离心管架、塑料

滴管、小烧杯、剪刀、称量纸、试纸条、玻璃研磨棒等。

4.3.3采样信息表根据实际情况包含以下内容：单位名称（公章）、序号、样品编号、取样地点（市、

县、乡）、GPS信息、试纸条检测参数及结果、抽样日期、抽样人员、备注。

5样品接收

5.1所送样品按照样品接收所规定的要求执行。

5.2样品接收应登记以下项目：样品名称、样品编号、检验类型、样品重量、样品状态、时间要求、是

否保留副样、报告领取方式、提供报告要求、检测依据、检测项目、委托单位、联系电话、付费总额、付费方式、委托人、到样日期、收样人、备注。

5.3在检出限量为0.1%的情况下，要求送检玉米样品数量应达到3000粒或重量达到1000g。如果送检

玉米样品不能达到规定数量或重量，则应注明不能复检。其它限量时需要的样品数量可以按照农业部2031号公告-19-2013的规定执行。

5.4样品接收时注意包装是否完好，如有破损应及时更换样品，对纱网袋包装的样品装入洁净无污染的

样品袋后再进行编号。

5.5样品由接样人员接收，登记，编号后，交由样品保管员入库管理。检测人员检测时填写样品领取返

还记录表。

6样品处理

6.1每份样品处理要使用独立的研磨杯，研磨杯在使用前应先刷洗