骨髓细胞学检测-化学染色及遗传学相关检查.pptxVIP

XXXX科

骨髓细胞学检测（二）

XXXXX医院

汇报人：医学生文献学习

五、血细胞的细胞化学染色

细胞化学染色基于细胞形态学，依据化学反应原理，对骨髓涂片按特定程序染色，在显微镜下观察细胞化学成分及其变化。各类血细胞的化学成分、含量与分布各异，病理状态下会改变。该染色有助于了解血细胞化学组成与病理生理变化，用于血细胞类型鉴别、某些血液病诊断与鉴别诊断、疗效观察及发病机制探讨。细胞化学染色方法多样，主要介绍常用的酶类、脂类、糖原、铁等细胞化学染色。

五、血细胞的细胞化学染色

（一）髓过氧化物酶染色

1.分布：

髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）主要存在于中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞。

粒细胞中含量多、活性高，阳性颗粒大且密集，染色后呈阳性、强阳性。

单核细胞含量较少，显色颗粒细小、分布稀疏，呈弱阳性。

其他细胞呈阴性反应。

五、血细胞的细胞化学染色

（一）髓过氧化物酶染色

2.临床意义：

主要用于骨髓原始细胞类型和急性白血病类型的鉴别。

急性髓系白血病（AML）：

急性粒细胞白血病时，白血病细胞多呈阳性、强阳性反应（个别处于偏早期发育阶段的粒细胞也会有偏弱的阳性）。

急性单核细胞白血病时，白血病细胞呈弱阳性或阴性反应。

急性粒-单核细胞白血病会出现阳性、弱阳性和阴性细胞并存的现象。

急性淋巴细胞白血病（ALL）时，白血病细胞呈阴性反应。MPO染色对急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病与急性淋巴细胞白血病之间的鉴别有重要价值。

五、血细胞的细胞化学染色

（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色

1.酶的分布与反应强度

中性粒细胞碱性磷酸酶（neutrophilalkalinephosphatase，NAP）主要存在于成熟阶段的中性粒细胞（分叶核及杆状核）。

巨噬细胞可呈现阳性反应，其他细胞均呈阴性反应。

阳性反应表现为胞质中出现由浅到深的颜色沉淀物，反应强度分为5级，即“-”“+”“++”“+++”“++++”。

反应结果以阳性反应细胞百分率和积分值表示。血涂片染色后，观察100个成熟中性粒细胞，阳性反应细胞所占百分率即为阳性率；对所有阳性反应细胞逐个按反应强度分级，将各级所占的百分率乘以级数，然后相加得到积分值。

五、血细胞的细胞化学染色

（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色

2.参考区间

成人NAP阳性率10%-40%；积分值40-80分。

因各实验室条件不同，参考区间存在差异，应建立自身实验室的参考区间。

五、血细胞的细胞化学染色

（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色

3.临床意义

1）生理性变化：NAP活性受年龄、性别、应激状态、月经周期、妊娠及分娩等因素影响，会有一定的生理性变化。

五、血细胞的细胞化学染色

（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色

3.临床意义

2）病理性变化：在病理情况下，NAP活性变化有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断。

慢性髓系白血病与类白血病反应：慢性髓系白血病时NAP活性明显减低，积分值常为0；细菌感染引起类白血病反应时NAP活性极度增高，可作为两者鉴别的重要指标。

急性白血病类型鉴别：急性粒细胞白血病时NAP积分值减低；急性淋巴细胞白血病的NAP积分值多增高；急性单核细胞白血病时一般正常或减低。

再生障碍性贫血与阵发性睡眠性血红蛋白尿症：再生障碍性贫血时NAP活性增高；阵发性睡眠性血红蛋白尿症时活性减低，可作为两者鉴别的参考。

其他血液病：一些成熟淋巴细胞的肿瘤如慢性淋巴细胞白血病，骨髓增殖性肿瘤如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化等，NAP活性中度增高。

内分泌及药物影响：垂体或肾上腺皮质功能亢进，应用肾上腺皮质激素、促肾上腺皮质激素（ACTH）、雌激素等，NAP积分值可增高。

五、血细胞的细胞化学染色

（三）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色

1.分布

氯乙酸AS-D萘酚酯酶（naphtholAS-Dchloroacetateesterase，AS-DNCE）又称特异性酯酶（specificesterase，SE）、粒细胞酯酶，主要存在于粒系细胞。

原始粒细胞为阴性反应或弱阳性反应。

自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均呈阳性反应，早幼粒细胞呈强阳性反应，酶活性随细胞的成熟而逐渐减弱。

嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、浆细胞、幼红细胞均呈阴性反应，个别单核细胞可呈弱阳性反应

五、血细胞的细胞化学染色

（三）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色

2.临床意义

急性粒细胞白血病时，原始粒细胞和早幼粒细胞酶活性明显增强，AS-DNCE染色呈强阳性反应。

急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病时均呈阴性反应。

急性粒-单核细胞白血病时，部分白血病细胞（粒系）呈