液相色谱法(共34张课件).pptxVIP

液相色谱法;1月6日(星期日)补1月3日（星期四）的课程;第十章高效液相色谱法;一、高效液相色谱法概述;二、高效液相色谱仪;2.1高压输液系统;（内梯度）;LC梯度洗脱与GC程序升温的比较

a、弱溶剂时，k’大的组分未流出；

b、强溶剂时，k’小的组分分不开；

c、中等强度溶剂时，k’小的组分1，2分不开；

d、梯度洗脱，各组分得到良好的分离;2.2进样系统;2.3分离系统（色谱柱）;紫外检测器：应用最广，可用于梯度洗脱，对大部分有机化合物有响应

光源：低压汞灯，254或280nm（固定波长）；氢灯、氘灯，200-400nm（可调波长）

检测池：很小，（1mm×10mm，容积小于10μL）；

接收元件：光电倍增管;紫外检测器的重要进展；

光电二极管阵列检测器：计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。

;脲的取代物与氨基甲酸酯的高速分离

降低背景电导(淋洗液)：减少噪音

化学键合相色谱（CBPC)

化学键合相色谱（CBPC)

聚乙二醇、氨基与腈基键合相

C18（简称ODS）、C8

粘度小，以此提高柱效

硝基苯胺异构体在10?m氧化铝上的LSC分离

淋洗液：9mmol/LNa2CO3

流速：1mL/min

进样量：25μL

HPLC与GC主要差别：

HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC

电导检测器：检测具有电导性化合物的通用型检测器，最常用。

主要测定高氯物质中的NO2-，NO3-等离子;三、HPLC的主要类型及分离原理;液固色谱（LSC,liquid-solidadsorptionchromatography）;应用：用于分离相对分子量中等的油溶性物质，另用于分离不同官能团的化合物和异构体。

缺点：非线性等温吸附常引起峰的拖尾现象;硝基苯胺异构体在10?m氧化铝上的LSC分离;液液分配色谱（LLPC);固定相：将固定液化学键合于载体（硅胶）表面形成固定相

固定相类型：

极性固定相：正相色谱

以极性有机基团如胺基（-NH2）、腈基（-CN）、醚基（-O-）等键合在硅胶表面制成的

非极性固定相：反相色谱

反相色谱法最常用的固定相是C18（十八烷基硅烷）、C8（辛烷基）和苯基键合相的填料。;正相色谱法;IC是HPLC的一种，是分析水溶液中阴离子的最佳方法。

固定相是离子交换树脂??流动相是淋洗液(强电解质)；电导检测器。

常用的淋洗剂是Na2CO3-NaHCO3混合液。只要改变两种物质的浓度比，就可以得到不同淋洗能力和pH值的流动相。

为消除淋洗液中强电解质背景离子对电导检测器的干扰，设置了抑制柱或抑制器。;ＳＯ４２－;;电导检测器：检测具有电导性化合物的通用型检测器，最常用。;极限摩尔电导值;抑制器的作用;免试剂离子色谱（Reagent-Free?）：传统离子色谱的问题——手工配制淋洗液和再生液;分离原理：基于分子尺寸的大小进行分离，样品组分与固定液间不存在相互作用现象

溴离子 25

7.

分离非极性和极性较弱化合物

固定相的排阻极限：因分子量过大而不能部分地进入某一给定固定相孔内的最小的样品粒子的分子量

脲的取代物与氨基甲酸酯的高速分离

C18预处理小柱、On-GuardRP\P柱——去除有机分子

贮液器：贮存流动相，由玻璃、不锈钢或氟塑料作成（0.

应用：用于分离相对分子量中等的油溶性物质，另用于分离不同官能团的化合物和异构体。

电导检测器：检测具有电导性化合物的通用型检测器，最常用。

4.

降低背景电导(淋洗液)：减少噪音

电导检测器：检测具有电导性化合物的通用型检测器，最常用。

二极管阵列检测器（DAD)：可得到所有波长上的色谱信号

Na2HPO4,Na2SO4

Na2HPO4,Na2SO4

液液分配色谱（LLPC);水中阴阳离子测定的样品前处理;（4）应用：在IonPacAS9-HC上分离消毒副产物;空间排阻色谱;空间排斥（阻）色谱

SizeExclusionChromatography;空间排斥（阻）色谱

SizeExclusionChromatography;空间排斥（阻）色谱

SizeExclusionChromatography