含中药肠吸收液体外实验操作规程-公示稿.pdfVIP

含中药肠吸收液体外实验操作规程-公示稿.pdf

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团体标准

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含中药肠吸收液体外实验操作规程

ResearchproceduresandstandardsonChinesemateriamedica-containing

intestinalabsorptionsolutionappliedtopharmacologicalexperimentinvitro

(文件类型:公示稿)

(完成时间:2025年1月)

20**-**-**发布20**-**-**实施

中华中医药学会发布

含中药肠吸收液体外实验操作规程

1范围

本文件确立了用于体外实验研究的含中药肠吸收液制备的标准操作规程。

本文件适用于多数以口服形式给药的中药单味药、中药复方或成方制剂的研究,特别是

水溶性至中等极性成分的体外实验研究,不适用于难溶于台氏液中的中药成分、脂溶性成分

或挥发油类成分的研究。本文件可应用于中药药理、方剂配伍、质量评价、药效物质基础以

及中西医结合基础等研究,可在普通环境的实验室操作。

2规范性引用文件

本文件无规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

外翻肠囊法Evertedgutsacmethod

本法由英国科学家Wilson和Wiseman于1954年创建,指动物在无麻或全麻状态下,

快速分离小肠,去除肠系膜,生理盐水或缓冲液冲洗干净。根据实验目的截取不同解剖部位

的肠段,将其黏膜翻向外侧,结扎一端形成肠囊状,内充以人工培养液后,结扎另一端,置

于含有被测物质的培养液中,通入95%氧气和5%二氧化碳的混合气体,培养一定的时间。

最早用于研究葡萄糖和氨基酸在肠道的代谢和转运,经多次改进成为最常用的体外肠道吸收

生物模型,用于研究药物体外吸收、肠道代谢以及转运蛋白的运输等。该法操作简便,实验

条件可控,重复性好,经济适用。

3.2

含中药肠吸收液Chinesemateriamedica-containingintestinalabsorptionsolution

按照外翻肠囊法的操作步骤,制备实验动物不同解剖部位的肠囊,将肠囊外翻并结扎一

侧,内充以适量Tyrode缓冲液(英文名Tyrode’ssolution,也称台式液),置于通入95%氧

气和5%二氧化碳的中药供试液中,37°C恒温孵育和交换一定的时间,得到肠管内含中药

的液体,经过滤处理后,即为含中药肠吸收液。

4制备原理

外翻肠囊法保留了完整组织和黏膜的特性,可在体外模拟体内生理状态下不同肠段对药

物的吸收情况。通过外翻肠囊法制备的含中药肠吸收液,作为中药(复方)口服后吸收入血

的药效成分/组分,应用于细胞、离体组织器官和类器官等,开展药效评价、机制研究和有效

成分辨识等研究。

1

5试剂和材料

5.1实验动物

一般建议选择雄性大鼠,可选取SPF级SpragueDawley(SD)大鼠,(8~10)周龄,

体重(230±20)g。

5.2试剂配制

Tyrode缓冲液是模拟小肠生理环境的营养液,其目的是使小肠能够长时间存活。配方:

氯化钾(KCl)0.28g、磷酸二氢钠(NaHPO)0.05g、氯化钠(NaCl)8.00g、氯化镁

24

(MgCl)0.10g、碳酸氢钠(NaHCO)1.00g溶于500mL蒸馏水中,密闭冷藏;氯化

23

钙(CaCl)0.20g用500mL蒸馏水溶解,密闭冷藏;使用前在不断搅

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