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DB43/TXXXX—2022

山羊冷冻精液生产技术规程

1范围

本标准规定了山羊冷冻精液生产的基本要求、稀释液配制、采精、精液处理、冻精活力检查、冻精包装、标签、储存及记录。

本标准适用于湘东黑山羊冷冻精液生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T4789食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB/T5458液氮生物容器

GB/T20557羊冷冻精液

GB/T30396牛冷冻精液包装、标识、贮存和运输

NY/T1234牛冷冻精液生产技术规程NY/T3186羊冷冻精液生产技术规程

3.术语和定义

NY/T3186界定的术语和定义适用于本文件。

4.基本要求

4.1种公羊要求

应具有种用价值或保护价值，体质健康，无遗传病和规定疫病，3代以上系谱完善。

4.2仪器设备要求

山羊冷冻精液生产仪器设备，见附录A（资料性附录）。

4.3器具要求

器具在使用前后消毒，保持清洁干燥。

4.4稀释液要求

使用商品化的专用稀释液按产品说明书配制，现配现用。

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5采精

5.1环境

采精场所应保持安静，地面防滑、并保持清洁卫生，有护栏等安全设施。

5.2采精前准备

5.2.1采精器具

将采精器具集精管、假阴道、漏斗、水浴锅、干燥箱有规则地摆放在操作台上。

5.2.2采精器润滑剂

将凡士林与液体石蜡1:1，用水浴煮沸消毒10min后置于62℃-65℃水浴锅内待用。

5.2.3台羊

台羊应选择健壮、性情温顺、无疫病的母羊，体表、外阴、臀部应确保清洁卫生，并保定于牢固的采精架内。

5.2.4公羊

采精种公羊体表应消洁卫生，修剪过长的阴毛。包皮确需冲洗的，冲洗干净30min后才可进行采精操作。

5.2.5采精器

将采精器安装好后，注入温水125mL-130mL。采精时内胎温度应达到38℃~43℃,有一定压力，外口呈三角形。集精杯温度维持在33℃~35℃。采精器的消毒和润滑剂的使用参照NY/T3186的规定执行。

5.3采精操作

5.3.1公羊靠近台羊时，应采取控制措施，不让公羊立即爬跨，使其充分排泄副性腺后进行2次-3次空爬，等待3min-5min后采精，空爬时不让阴茎触及台羊。性欲不强的公羊采取观摩、引诱、被爬跨和更换台羊、地点等措施引导采精。

5.3.2采精员手持采精器站在公羊侧后方，当公羊阴茎伸出爬跨时，迅速向前托着公羊包皮，采精器口斜向下方，双手配合将阴茎引人采精器口内，公羊往前一冲完成射精。采精器紧随公羊阴茎移动，当阴茎缩回后立即将采精器口斜向上方，打开活塞，取下集精管，迅速从传递窗口送至精液处理室。安装好的采精器只能使用一次，不得重复使用。

5.3.3公羊一般3-4天采精1次，视年龄、身体状况增减次数，每次可连续采精2回（间隔时间30min以上），采精充分（集精管内泡沫丰富，精液量大且稠密）的公羊不宜连续采精。

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6精液处理

6.1准备

凡是接触精液的器皿均应放在32℃-37℃恒温箱中，稀释液放在32℃-35℃恒温水浴箱中备用。盛装稀释精液的稀释瓶应做明显标记。

6.2外观检查

主要观察精液的色泽，气味及是否有脓性分泌物或血液等异物。正常情况下，精液为乳白色或微黄，略有腥味。

6.3采精量测定

直接读取集精管上刻度（精确到0.1mL），记录采精量。

6.4精子密度测定

使用精子密度测定仪进行测定，按GB/T20557中A.3规定。

6.5精子活力测定

取精液和稀释液5μL-10μL于载玻片上，加盖盖玻片后在37℃恒温装置的相差显微镜上评定活力，用百分率。按GB/T20557中A.3规定。

6.6精液评价及处理

外观正常、密度≥6×108个/mL、活力≥65%、畸形率≤15%的精液用于冻精生产，进行后续处理。

6.7稀释、平衡

按NY/T3186中6.4进行操作。

6.8标识

冷冻精液细管上应有明确的标识，所印字迹应清晰易认，信息齐全。具体标识方法附录B(规范性附录)。

7精液冷冻

7.1上架

灌装、封口、标识后的细管上架码放时，应注意细管摆放的方向，棉塞封口端靠近操作者，超声波封口端远离操作者。放入程控冷冻仪时亦应如此放置。用区分棒做好不同羊号细管间的识别工作。

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7.2冷冻

采用程控冷冻仪冷冻精液，程控冷冻仪与低温平衡柜应尽量靠近，设置好最佳冷冻程序