人参果脱毒种苗生产技术规程.docxVIP

1

DBXX/XXXXX—XXXX

人参果脱毒种苗生产技术规程

1范围

本文件规定了人参果无菌苗的培养、茎尖培养脱毒、脱毒组培苗快繁及人参果脱毒种苗扩繁的技

术要求和操作规程。

本文件适用于人参果脱毒技术应用与脱毒种苗繁育。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T

29375—2012

马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程

NY/T

401—2000

脱毒马铃薯种薯（苗）病毒检测技术规程

3术语和定义

GB/T29375-2012界定的和下列术语和定义适用于本文件，为了便于使用，以下重复列出了GB/T29375-2012的部分术语和定义。

3.1

外植体explant

指植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段，本标准中是指用于无菌苗培养的人参果植株顶芽、腋芽及茎段等不同部位的材料。

3.2

离体培养in-vitropropagation

从植物体分离出符合需要的器官、组织、细胞、原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其它产品的技术。

[来源：GB/T29375—2012，术语定义3.4]

3.3

无菌苗asepticseedlings

指在无菌条件下，将从大田人参果健康植株上获得的顶芽、腋芽及茎段严格按外植体的消毒流程进行消毒后，接种到MS培养基（可添加或不添加激素）上，在人工控制条件下，通过无菌培养获得的完整植株。

3.4

2

DBXX/XXXXX—XXXX

茎尖stemapex

芽顶端部分（0.1mm～10mm）其中包括分生组织（0.05mm～0.1mm）及芽原基和正在生长发育的叶原基。

[来源：GB/T29375—2012，术语定义3.2]

3.5

茎尖分生组织stem-apexmeristem

茎部位具有持续或周期性分裂能力的细胞群。[来源：GB/T29375—2012，术语定义3.3]

3.6

叶原基leafprimordium

在茎尖生长点的侧面由表面的几层细胞分裂形成的突起。3.7

脱毒核心苗virus-freecoreplantlets

通过茎尖分生组织培养技术获得的经检测不带危害该种植物的主要病毒，不带任何细菌和真菌、品种纯正的再生试管苗。

3.8

基础苗basicplantlets

由脱毒核心苗繁殖的、经检测无病毒的脱毒苗。[来源：GB/T29375—2012，术语定义3.7]

3.9

炼苗acclimatization

组培苗在培养瓶中长成完整的植株后，从培养瓶中取出移植到基质中，使其适应外界温度、湿度及光照等自然环境条件的锻炼过程。

3.10

脱毒种苗virusfreeseedlings

本标准中脱毒种苗指由基础苗快繁培育出的脱毒组培苗并经隔离温室炼苗后直接应用于大田生产的种苗或脱毒组培苗炼苗后作为母苗，剪取顶芽、茎段在隔离温室进行二次扦插繁育生产的经检测合格的扦插种苗。

4脱毒种苗生产设施、设备及化学试剂

4.1组培实验室

组培实验室应建设在向阳、通风、干燥、清洁的环境，周围应无污染源，与大田生产隔离。组培实验室要具备清洗室、配制室、灭菌室、无菌贮存室、缓冲间、更衣室、接种室、培养室等，各房间应隔离，各房间面积根据生产实际需要而定。各功能区布局应遵守操作流程，遵循方便消毒、减少污染的原则。组培实验室布局平面示意图参见附录A。

3

DBXX/XXXXX—XXXX

4.2温室

脱毒组培苗炼苗和扦插繁育设施可采用智能温室或钢架大棚，周围200m～500m范围内没有茄科作物病虫害浸染源或蚜虫、蓟马等寄主植株种植，设施四周通风口应安装40目～60目防虫网，温室或大棚的面积可根据生产实际和条件而定。

4.3仪器设备、玻璃器皿及试剂

4.3.1仪器设备、玻璃器皿

仪器设备包括用于药品称量、培养基配制、灭菌、接种、温度控制等，玻璃器皿包括盛装器皿（烧

杯、试剂瓶等）、培养容器（培养瓶）、计量器皿（量筒、容量瓶等）以及其他常用玻璃消耗品等。仪器设备和玻璃器皿参见附录B。

4.3.2试剂

植物组培中常用的试剂包括无机盐类、有机物、植物生长调节剂、消毒剂等。试剂参见附录B和附录C。

5常用溶液的配制

5.1MS培养基母液

MS培养基母液配制参见附录C表C.1～C.4。

5.2生长激素母液

激素类母液配制方法参见附录C表C.5。

6无菌苗的培养

6.1无菌苗培养基的制备

无菌苗培