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- 2025-02-14 发布于浙江
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课时2赋予生物新的遗传特性的基因工程
重点1基因工程和蛋白质工程
【知识盘查】
1.归纳基因工程的基本工具
提醒若用不同的限制酶切割出不同的黏性末端,则能使目的基因和载体定向连接,避免自身环化和反向连接,提高连接的有效性。
2.理解掌握基因工程的操作步骤
(1)目的基因的筛选与获取
(2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建
提醒①启动子和终止子:启动子(DNA片段)≠起始密码子(位于mRNA上);终止子(DNA片段)≠终止密码子(位于mRNA)上。
②目的基因插入位置:启动子与终止子之间。
③利用乳腺生物反应器生产药物时,应将目的基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起。
(3)将目的基因导入受体细胞
(4)目的基因的检测与鉴定
提醒PCR技术不仅可用于获取和扩增目的基因,还能用于检测受体细胞中是否含有目的基因或受体细胞中的目的基因是否转录出mRNA。
3.图示法解读蛋白质工程
【曾经这样考】
1.(2023·新课标卷,6)某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具,将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接,以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()
A.质粒和目的基因都用酶3切割,用E.coliDNA连接酶连接
B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切
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